ГОСТ Р ИСО 20395-2023. Национальный стандарт Российской Федерации. Биотехнология. Требования к оценке эффективности методов количественного определения последовательностей нуклеиновых кислот-мишеней. Количественная ПЦР и цифровая ПЦР

9 Прослеживаемость и сопоставимость измерений количественного определения нуклеиновых кислот

 

9.1 Метрологическая прослеживаемость

Прослеживаемость результата измерения относится к метрологической прослеживаемости. Она соотносит результат с единицами СИ или другими согласованными стандартами/ссылками. Прослеживаемость важна для сопоставимости аналитических результатов (см. ИСО/МЭК 17025).

Метрологическую прослеживаемость результатов измерений цПЦР и кПЦР устанавливают в соответствии с ИСО 17511.

Величины со знаками подсчета, в том числе копии определенной последовательности нуклеиновых кислот, имеют значение один. Один по своей природе является элементом любой системы единиц. Величины с единицей один можно рассматривать как прослеживаемые до СИ [54]. Таким образом, формальная прослеживаемость до СИ может быть получена с помощью соответствующих валидированных процедур измерения.

В качестве процедуры измерения, основанной на подсчете, цПЦР может стать основой первичной эталонной процедуры измерения концентрации числа копий нуклеиновых кислот (для фрагментов нуклеиновых кислот, амплифицируемых в данных условиях экспериментальной ПЦР), при условии установления специфичности и полноты подсчета и заявления о неопределенности измерений [55], [56].

9.2 Использование стандартных образцов

Стандартные образцы следует использовать для обеспечения аналитической прослеживаемости результатов измерений и верификации показателей процесса измерения нуклеиновых кислот. При наличии соответствующих стандартных образцов на основе нуклеиновых кислот следует использовать их по назначению.

9.3 Калибровка приборов

Приборы, используемые для количественного определения нуклеиновых кислот, необходимо откалибровать с использованием соответствующих калибраторов и/или стандартных образцов, при наличии. Вспомогательное оборудование, включая, помимо прочего, весы и микропипетки, также должно быть откалибровано.