ГОСТ Р ИСО 23162-2023. Национальный стандарт Российской Федерации. Исследование качества спермы базовое. Требования и методы исследований

5 Характеристика спермы, сбор образцов и обработка перед исследованием

5.1 Общие характеристики

Исследование эякулята отличается от исследований других жидкостей человеческого организма. Предполагается, что пациент самостоятельно соберет эякулят. Результаты исследований зависят от частоты эякуляций перед сбором спермы, а также от времени и температуры хранения спермы до начала исследований. В случае диагностики бесплодия отсутствуют четкие референтные интервалы, поскольку результат зависит от конкретной клинической ситуации каждой пары, стремящейся к зачатию ребенка.

5.2 Физические и химические характеристики

В эякуляте, собранном в контейнер для проведения лабораторных исследований, отсутствует внутренний гомеостатический контроль. В момент семяизвержения сперма имеет жидкую консистенцию, без комочков и включений, затем эякулят переходит в гелеобразное состояние. Это естественный процесс, необходимый для защиты сперматозоидов от негативных внешних воздействий, затем сперма снова становится жидкой. Во время этого процесса углекислый газ испаряется, вызывая изменение pH. Ферментативная деградация компонентов геля вызывает значительное повышение осмотических свойств жидкости, окружающей сперматозоиды, что в свою очередь влияет на работоспособность сперматозоидов.

5.3 Сбор образцов спермы и их первоначальная обработка

Сбор образцов спермы всегда должен проводиться самим пациентом, за исключением случаев, когда мужчины имеют инвалидность конечностей, травму спинного мозга или паралич нижних конечностей. При необходимости партнер пациента может помочь со сбором образцов. Для пациента с этическими или религиозными возражениями против мастурбации неспермотоксичный (Silastic^TM) <1> презерватив можно использовать для сбора эякулята во время полового акта. Однако этот метод сбора приведет к некоторой потере количества образца спермы, поскольку сперма будет извлечена из презерватива. Сбор эякулята путем прерванного полового акта ("отмены") не рекомендуется, так как часто теряется первая, богатая спермой фракция эякулята. Некоторым пациентам может потребоваться использование смазочных материалов; такие продукты должны быть нетоксичны для сперматозоидов [13].

--------------------------------

<1> Silastic^TM является примером подходящего продукта. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не означает одобрения ИСО этого продукта.

После эякуляции образец должен храниться при температуре, близкой к 37 °C (не выше); охлаждение или нагревание могут вызвать артефакты и дисфункцию сперматозоидов. В связи со всеми изменениями, происходящими после эякуляции, исследование следует начинать как можно раньше после разжижения, которое обычно завершается в течение 30 мин после эякуляции. Неполное разжижение через 60 мин после эякуляции указывает на аномалию. Начало исследования после завершения разжижения в большей степени достигается, если эякулят собирают в максимальной близости от лаборатории. Поскольку продолжительность и уровень сексуального возбуждения, которые испытывает пациент, будут влиять на эякуляцию, сбор образцов следует проводить в месте, выбранном пациентом. Когда эякулят собирают за пределами лаборатории, он должен быть доставлен в лабораторию в течение 30 мин, но не более чем в течение 60 мин (обстоятельства сбора и транспортирования эякулята должны быть зафиксированы в протоколе). Соблюдение требований к температуре хранения и времени доставки в лабораторию является важным фактором для обеспечения качества и надежности результатов исследования.

5.4 Информация о пациенте и сбор данных

5.4.1 Информация, предоставляемая пациенту

Информация, предоставляемая пациенту в письменной форме на понятном ему языке:

a) общая информация:

- контактные данные лаборатории,

- причина проведения исследования, если информация получена от пациента,

- виды исследований,

- способ передачи результатов лабораторных исследований;

b) сбор, обработка и транспортирование эякулята:

- способ сбора эякулята,

- влияние задержки между сбором образца и началом исследования,

- информирование о важности соблюдения температурных параметров для хранения эякулята,

- информирование о значимости длительного полового воздержания,

- информирование о важности сообщения о любой причине сбора образца не в полном объеме.

5.4.2 Сбор данных от пациента

a) Необходимая информация

Каждому пациенту предлагают предоставить следующую информацию, которая будет документально зафиксирована лабораторией:

- достаточные для идентификации данные пациента (не менее двух уникальных идентификаторов, относящихся к пациенту и указанных направившей организацией);

- продолжительность полового воздержания;

- время сбора образца;

- следует избегать транспортирования эякулята, однако, если эякулят собран не в помещении лаборатории, необходимо подтвердить соблюдение условий и времени транспортирования образца в лабораторию;

- полнота сбора эякулята с первой до последней капли; в случае неполного сбора необходимо указать, какие части в последовательности эякуляции пропущены.

b) Дополнительная информация

Информация, которая является значимой для клинической интерпретации результатов исследования (однако сбор такой информации не является частью лабораторной деятельности):

- история болезни, которая может включать:

- любой эпизод тяжелого воспалительного процесса за последние три

месяца,

- любые предшествующие хирургические вмешательства (паховая грыжа,

варикоцеле, крипторхизм или другие проблемы, связанные с мочеполовой

сферой) или лечение химиотерапией, цитостатиками или облучением мочеполовых

органов,

- любое использование фармацевтических препаратов, за исключением

краткосрочного использования безрецептурных препаратов (например,

болеутоляющих и противоаллергических препаратов);

- любое использование наркотиков, анаболических стероидов или

других пищевых добавок, повышающих работоспособность (например, протеиновых

порошков).

5.5 Начальная обработка образца

Каждый эякулят следует считать потенциально инфекционным и обращаться с ним соответствующим образом (см. ИСО 15190:2020, приложение B).

Информация, предоставленная пациентом, должна быть задокументирована.

Контейнер для сбора образцов должен быть чистым, нетоксичным и одноразовым.

Контейнер для сбора образцов рекомендуется взвесить перед сбором образцов, полученное числовое значение указывают в граммах с точностью до двух десятичных знаков.

Объем эякулята рекомендуется определять по весу. В этом случае контейнер для сбора образцов взвешивают, полученное числовое значение указывают в граммах с точностью до двух десятичных знаков до и после сбора образцов, а разницу результатов взвешивания используют как объем, принимая, что 1,0 г эякулята равен 1,0 мл эякулята [3]. Если используют калиброванную серологическую пипетку, то некоторое количество спермы всегда будет оставаться в контейнере для сбора образцов и внутри пипетки после проведения исследования. В лаборатории должны быть разработаны документированные процедуры выполнения указанных методов определения объема эякулята. Объем эякулята указывают в миллилитрах с точностью до одного десятичного знака.

Все документы и контейнер для сбора образцов должны быть промаркированы как минимум двумя уникальными идентификаторами.

В максимально короткие сроки после сбора эякулята контейнер для сбора образцов должен быть помещен в контейнер для транспортирования образцов с поддержанием температуры от 35 °C до 37 °C для облегчения процесса разжижения и для подготовки к исследованию подвижности сперматозоидов при вышеуказанной температуре, предпочтительно на подвижном лотке для улучшения перемешивания во время разжижения (когда движущийся лоток недоступен, необходимо частое ручное перемешивание).

На сперматозоиды действует гравитация земли, поэтому они оседают на дно любого контейнера ("геотаксис"), даже если они подвижны. Следовательно, образец необходимо тщательно перемешать, чтобы равномерно распределить сперматозоиды и другие элементы эякулята. Даже сидение пациента в течение короткого периода времени приведет к неравномерному распределению клеточных элементов эякулята. Поэтому необходимо тщательно перемешать эякулят перед взятием любой аликвоты для исследования, учитывая, что не допускается использовать вихревой смеситель.

5.6 Исследование токсичности спермы

Для того чтобы убедиться в том, что материалы, контактирующие с эякулятом (контейнер для сбора образцов, наконечники дозаторов), не являются токсичными для сперматозоидов, рекомендуется для каждой новой партии таких материалов проводить входной контроль на токсичность. Принцип указанного контроля основан на сравнении подвижности сперматозоидов, подвергшихся воздействию настоящего и нового материалов [6]. Время воздействия должно как минимум в два раза превышать ожидаемое время воздействия материала на сперму: секунды - для наконечников дозаторов и от 30 до 60 мин - для контейнеров для сбора образцов.