ГОСТ ISO 10993-11-2021. Межгосударственный стандарт. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 11. Исследования общетоксического действия

5.2 Планирование исследования

 

5.2.1 Подготовка животных

Здоровые молодые половозрелые животные акклиматизируются к лабораторным условиям как минимум в течение 5 сут до начала исследования.

Более короткие сроки должны быть обоснованы. Животных рандомизируют и распределяют по экспериментальным группам.

5.2.2 Лабораторные животные

5.2.2.1 Выбор вида

Используют, как правило, грызунов (крыс, мышей). Характеристики модели (возраст, масса и т.д.) установлены в 4.2 и 4.3. Использование животных, не являющихся грызунами, должно быть обосновано.

5.2.2.2 Число и пол

Число и тип групп, количество животных в группе и их пол установлены в 4.5.

5.2.2.3 Условия размещения и кормления

Температура и относительная влажность в помещениях для экспериментальных животных должны соответствовать их виду, например, температура (22 +/- 3) °C и влажность от 30% до 70% для мышей. Режим искусственного освещения, как правило, - 12 ч освещения и 12 ч темноты.

Для кормления животных допускается использовать стандартные коммерческие лабораторные корма, при этом следует обеспечить животным неограниченный доступ к питьевой воде. Животных размещают в клетках группами по полу или, при необходимости, индивидуально, при групповом размещении допускается помещать не более пяти животных в одну клетку.

5.2.3 Условия исследования

5.2.3.1 Уровни доз

Уровни доз - в соответствии с 4.8.

Обращение с животными контрольной группы должно быть идентично обращению с животными исследуемой группы за исключением введения исследуемого образца.

5.2.3.2 Процедура

Животные получают однократную дозу исследуемого образца или, если необходимо, многократные дозы в течение одного 24-часового периода. Негативные признаки следует регистрировать по мере наблюдения, включая их начало, степень и длительность.

Следует осуществлять регулярное наблюдение за животными для предотвращения случаев их падежа из-за каннибализма, автолиза тканей или побега. По окончании исследования всех выживших животных подвергают эвтаназии. Животных с признаками болезни удаляют из исследования и подвергают эвтаназии (если замечены признаки болезни в поведении животных). Методы, используемые для эвтаназии, должны соответствовать национальным или международным требованиям к обращению с животными.

Следует применять такие график наблюдения и гуманные конечные точки, чтобы предотвратить смертность животных непосредственно из-за токсичности исследуемого образца.

5.2.4 Масса тела

Массу тела животных следует измерять непосредственно перед введением дозы, ежедневно в течение первых трех суток после начала введения, еженедельно после первой дозы, если длительность исследования это позволяет, и по окончании исследования.

5.2.5 Клинические наблюдения

При исследовании острой токсичности период наблюдения должен составлять не менее трех суток или более, если это допустимо. Частота наблюдения и негативные признаки приведены в 4.10 и приложении C. Наблюдения проводят с достаточной частотой, при этом выполняют определенные действия, обеспечивающие минимальные потери среди исследуемых животных, например, вскрытие или заморозка животных, найденных мертвыми, и изоляция или умерщвление слабых или болезненных животных. Визуальные наблюдения включают в себя регистрацию следующих обязательных признаков: изменения кожи и шерсти, глаз и слизистых оболочек, изменения в вегетативной и центральной нервных системах, дыхательной и кровеносной системах, при этом не следует ограничиваться указанными признаками в соматомоторной деятельности и в схемах поведения, которые идентифицируют в соответствии с приложением C.

5.2.6 Патология

5.2.6.1 Клиническая патология

Оценку клинической патологии проводят при наличии клинических показаний, например МИ с ожидаемой или наблюдаемой токсичностью (по результатам предыдущих исследований) или новых материалов/МИ при отсутствии опыта клинического применения. При оценке клинической патологии проводят следующие исследования:

a) гематологию, см. приложение D, проводят по окончании периода исследования;

b) клиническое биохимическое исследование крови, см. приложение D, проводят по окончании периода исследования. Объектами исследований при оценке острой токсичности являются функции печени и почек. При необходимости допускается проводить дополнительное клиническое биохимическое исследование крови для продления наблюдения за отмеченными негативными признаками.

Анализ мочи (см. приложение D) на регулярной основе проводить не требуется. Анализ мочи выполняют только при показаниях, основанных на ожидаемой или наблюдаемой токсичности. Рекомендуемые показатели приведены в приложении D.

5.2.6.2 Патологоанатомические исследования

Проводят патологоанатомические исследования материалов/МИ с ожидаемой или наблюдаемой токсичностью (по предыдущему исследованию) или новых материалов/МИ при отсутствии опыта клинического применения. Патологоанатомические исследования включают в себя осмотр внешних покровов тела, всех отверстий, а также черепной коробки, грудной и брюшной полостей и их содержимого. При необходимости следует учесть массы мозга, печени, почек, надпочечников и семенников, которые взвешивают во влажном состоянии как можно скорее после вскрытия во избежание высыхания и получения ложно низких значений.

5.2.6.3 Гистопатология

При исследованиях острой токсичности, как правило, не проводят полные гистопатологические исследования на органах и тканях животных, если оно не показано необычной картиной при общем вскрытии.