ГОСТ Р ИСО 21474-1-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Медицинские изделия для диагностики in vitro. Мультиплексные молекулярные методы для определения содержания нуклеиновых кислот. Часть 1. Терминология и общие требования к оценке качества нуклеиновых кислот

Приложение D

(справочное)

 

ОБРАЗЕЦ микроРНК

 

Качество образцов РНК для анализа микроРНК можно оценить по концентрации, измеренной на спектрофотометре, и по чистоте, проанализированной электрофорезом.

Целостность РНК может быть проанализирована в соответствии с приложением A в качестве дополнительной оценки качества. В целом количество микроРНК невелико; например, РНК примерно 1 нг или менее получают из 300 см³ (мл) плазмы крови или сыворотки [39], [40]. Целостность согласно приложению A не применяют к показателю для представления качества образца РНК, извлеченного из плазмы крови, поскольку он не содержит рРНК. В частности, использование сыворотки в качестве материала для малой экстракции РНК приведет к малому профилю РНК, который сильно отличается от профиля пациента, так как активация тромбоцитов во время свертывания крови индуцирует процессы, значительно изменяющие профиль.

Процесс оценки качества необходим из-за значительной чувствительности образцов микроРНК к РНКазе, которую трудно инактивировать. Процесс оценки качества перед измерением помогает обеспечить надежность результатов измерений, поскольку даже малейших количеств РНКазы достаточно для деградации образца.