ГОСТ Р ИСО 3826-4-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Контейнеры пластиковые гибкие для человеческой крови и ее компонентов. Часть 4. Системы контейнеров для крови со встроенными/интегрированными функциями/элементами, предназначенные для аферезных методов

Приложение C

(обязательное)

 

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

 

C.1 Общая информация

Общие биологические тесты для медицинских устройств - см. в серии ИСО 10993. ИСО 10993-12 определяет подготовку проб и справочные материалы. Производители должны проводить соответствующие исследования, чтобы продемонстрировать биологическую совместимость со всеми применимыми частями ИСО 10993.

C.2 Приготовление растворов для исследований

C.2.1 Исследование жидкости I (полярный экстрагент)

Заполняют дважды пустой пластиковый контейнер до номинальной вместимости водой для инъекций, встряхивают в течение примерно 1 мин, а затем опорожняют. После слива промывочной воды заполняют пустой контейнер достаточным количеством стерильного, не содержащего эндотоксинов раствора хлорида натрия <6> , чтобы отношение внутренней поверхности пустого контейнера, выраженной в квадратных сантиметрах, к объему раствора хлорида натрия, выраженному в миллилитрах, составляло не менее 6:1. Затем контейнер сжимают так, чтобы оставшийся воздух вышел из него, после чего закрывают. Если контейнер упакован в дополнительный пакет, извлекают его не менее (60 +/- 12) мин в насыщенном паре под давлением при температуре (121 +/- 2) °C. Выполняют экстракцию необходимого количества контейнеров для получения как минимум 250 см³ (мл) экстракта. Смешивают экстракты из отдельных контейнеров после их охлаждения. Обрабатывают в колбе таким же образом 250 см³ (мл) стерильного, не содержащего эндотоксинов изотонического раствора хлорида натрия в качестве жидкости для сравнения (пустой образец).

--------------------------------

<6> См. ссылку [1].

 

C.2.2 Исследование жидкости II (неполярный экстрагент)

Подготавливают испытуемую жидкость (экстракт) II таким же образом, как и испытываемую жидкость I в соответствии с C.2.1, при этом:

- высушивают пустые контейнеры после промывки водой для инъекций при температуре (50 +/- 2) °C в течение 1 ч или до тех пор, пока влажность больше не будет определяться визуально;

- используют кунжутное масло для парентерального применения <7> или хлопковое масло <8> в качестве экстракционного агента;

- используют кунжутное масло для парентерального применения <7> или хлопковое масло <8> в качестве сравнительной жидкости в соответствии с используемыми экстракционными агентами;

- используют описанный неполярный экстрагент в конкретном биологическом тесте.

--------------------------------

<7> См. Европейскую фармакопею или Фармакопею США.

<8> Фармакопея США.

 

C.3 Исследование на непроницаемость для микроорганизмов

Заполняют пустые контейнеры до их номинальной вместимости в стерильных условиях питательной средой для культур, например казеиново-соевой пептонной мукой пептонного мясного бульона (CaSo). Погружают контейнеры или их соответствующие части в суспензию [приблизительно 10⁶ КОЕ/см³ (КОЕ/мл)] заражающего микроорганизма (например, Bacillus atropheus, NCTC 10073) как минимум на 30 мин. Вынимают контейнеры из суспензии и промывают стерильной водой. Инкубируют контейнеры в течение, по крайней мере, семи дней при температуре, подходящей для заражающего организма (например, 37 °C для Bacillus atropheus).

Контейнер, подготовленный таким же образом, содержимое которого инокулируют 1 см³ (мл) культуры контрольного штамма, служит в качестве изделия для положительного контроля. Или же подготавливают образец с положительным контролем, используя один контейнер, заполненный питательной средой. Это может быть достигнуто путем прокалывания конкретной области контейнера.

Изучают содержимое на предмет роста микробов. Положительный контроль должен быть мутным. Испытуемые изделия не должны быть мутными.

C.4 Исследование на бактериальные эндотоксины

Проводят исследования на бактериальные эндотоксины согласно соответствующей фармакопее.

C.5 Исследование на цитотоксичность

Проводят тестирование на цитотоксичность в соответствии с ИСО 10993-5.

C.6 Исследование на гемолиз

C.6.1 Общая информация

См. ИСО 10993-4.

C.6.2 Приготовление суспензии эритроцитов

Разводят одну часть объема свежезаготовленной крови человека, которая была антикоагулирована в соответствии с национальной фармакопеей, пятью объемными частями стерильного раствора хлорида натрия и центрифугируют в течение 5 мин в центрифуге от 1 500 до 2 000 g. Аспирируют раствор супернатанта и повторяют обработку эритроцитов в тех же условиях и с тем же объемом раствора хлорида натрия.

Полученные таким образом эритроциты разбавляют стерильным раствором хлорида натрия в соотношении 1:9 . Данную суспензию можно использовать не более 6 ч с учетом хранения при температуре (23 +/- 2) °C.

C.6.3 Процедура исследования (методика)

Выпаривают 125 см³ (мл) исследуемой жидкости, приготовленной в соответствии с A.3, при температуре 100 °C. Растворяют остаток после выпаривания в 5 см³ (мл) стерильного раствора хлорида натрия , смешивают с 1 см³ (мл) суспензии эритроцитов и выдерживают в течение 20 мин при температуре (37 +/- 1) °C. Затем центрифугируют смесь в течение 5 мин при 1500 - 2000 g.

Готовят контрольный раствор одновременно в тех же условиях, но без добавления выпаренного остатка исследуемого раствора.

Измеряют поглощение исследуемого раствора по сравнению с контрольным раствором при 540 нм в кювете с внутренним световым путем 1 см. Поглощающая способность испытуемого раствора не должна отличаться от поглощающей способности контрольного раствора более чем на 10%.

Летучие компоненты в исследуемом растворе не могут быть обнаружены описанной методикой. Однако концентрация испытуемого раствора должна приводить к более высокой чувствительности методики.

C.7 Методы биологических исследований

ИСО 10993-1 следует рассматривать как руководство при оценке биологической безопасности.

 

Таблица C.1

 

Биологические методы исследований

 

Ссылка	Биологическое испытание	Метод испытания, рекомендуемый для использования
C.7.1	Взаимодействие с кровью	По ИСО 10993-4 <a>
C.7.2	Цитотоксичность клеточной культуры	По ИСО 10993-5. Фармакопея США. Биологические тесты на реактивность в лабораторных условиях <87>
C.7.3	Гемолиз	По ИСО 10993-4. Европейская фармакопея (глава 3.2.3)
C.7.4	Системная инъекция (острая токсичность)	По ИСО 10993-11. Фармакопея США. Тесты биологической реактивности в естественных условиях <88>
C.7.5	Аллергены	По ИСО 10993-10
C.7.6	Внутрикожная инъекция (раздражение)	По ИСО 10993-10. Фармакопея США. Тесты биологической реактивности в естественных условиях <88>
C.7.7	Тестирование на пирогены	Европейская фармакопея (глава 2.6.8). Фармакопея США (общие тесты и анализ, <151>). Японская фармакопея (глава 4.04)
<a> Предлагаемый выбор теста на взаимодействие с кровью: уровень 1 - непрямое направление кровотока; уровень 2 - кровообращение.