ГОСТ Р ИСО 3826-4-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Контейнеры пластиковые гибкие для человеческой крови и ее компонентов. Часть 4. Системы контейнеров для крови со встроенными/интегрированными функциями/элементами, предназначенные для аферезных методов

Приложение A

(обязательное)

ХИМИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ

A.1 Общая информация

На испытания (исследования) берут материалы готовых, стерилизованных и, при необходимости, опорожненных пластиковых контейнеров, контактирующих с кровью и ее производными (компонентами). Испытаниям подлежат изделия в том состоянии, в котором контейнеры будут использоваться для процедур переливания, сбора, отделения и хранения, включая полимерную пленку, используемую для контейнера для сбора, и пластиковые трубки, используемые для сбора, переливания между частями системы, а также любые части, вступающие в контакт с кровью и ее компонентами.

A.2 Определение (сухого) остатка при прокаливании

Навеску испытуемого материала от 1,00 до 2,00 г помещают в предварительно прокаленный до постоянной массы плавильный тигель, нагревают при температуре от 100 °C до 105 °C в течение 1 ч. Затем нагревают до обугливания при температуре (550 +/- 25) °C. Дают остыть в эксикаторе и взвешивают, прокаливание повторяют, пока не будет достигнута постоянная масса. Вычисляют массу остатка при прокаливании на грамм исходного материала.

Могут быть использованы эквивалентные методы, описанные в фармакопеях.

A.3 Подготовка экстракта (вытяжки) для исследования

Заполняют пустой контейнер до номинального объема водой для инъекций, встряхивают в течение примерно 1 мин, а затем опустошают. Процедуру повторяют дважды. Заполняют пустой контейнер до номинального объема водой для инъекций и сжимают контейнер так, чтобы оставшийся воздух вышел из него, а затем закрывают. Процедуру экстракции проводят в течение как минимум 30 мин в насыщенном паре под давлением при температуре (121 +/- 2) °C. Используют 250 см³ (мл) воды для инъекций в качестве холостой пробы. Время нагрева и охлаждения не входит в требование соблюдения времени цикла, составляющего 30 мин.

При необходимости экстрагирование может быть выполнено на полимерной пленке или необработанном контейнере. Используют образцы с общей площадью поверхности 1500 см², которая включает в себя обе стороны пластикового листа. Дважды промывают данный материал 100 см³ (мл) воды для инъекций и утилизируют воду после использования. Образцы заливают 250 см³ (мл) воды для инъекций и экстрагируют в течение 30 мин в насыщенном паре под давлением при температуре (121 +/- 2) °C. В качестве холостой пробы используют воду для инъекций.

Исследования на полимерной пленке возможны только в том случае, если пластиковый материал является однородным. Многокомпонентная полимерная пленка должна быть сначала трансформирована в эквивалентный контейнер для селективного испытания внутренней поверхности.

Если контейнер не предназначен для стерилизации при температуре выше 121 °C, то в качестве альтернативы экстракцию могут проводить при температуре (100 +/- 2) °C в течение 2 ч или при температуре (70 +/- 2) °C в течение (24 +/- 2) ч, и в этом случае выбранная температура не должна быть ниже той, при которой проводят стерилизацию контейнера.

Если раствор, полученный в результате экстракции одного контейнера или одного образца полимерной пленки, имеет недостаточный объем для проведения всех необходимых исследований, растворы от двух или более экстракций могут быть объединены для получения составного раствора для проведения исследований. Если к контейнеру применяют альтернативные способы стерилизации, отличные от термической стерилизации, например , стерилизацию оксидом этилена или электронно-лучевую стерилизацию, то используют стерилизованные данным методом контейнеры для приготовления экстракта (вытяжки).

A.4 Исследования

A.4.1 Определение окисляемых компонентов

К 20,0 см³ (мл) экстракта (или холостой пробы) прибавляют 20,0 см³ (мл) раствора перманганата калия [c(KMnO₄) = 0,002 моль/дм³ (моль/л)] и 1,0 см³ (мл) серной кислоты [c(H₂SO₄) = 1 моль/дм³ (моль/л)], кипятят в течение 3 мин. Добавляют 1,0 г йодида калия и титруют раствор тиосульфатом натрия [c(Na₂S₂O₃) = 0,01 моль/дм³ (моль/л)] до светло-коричневого цвета. Затем добавляют пять капель раствора крахмала и титруют до получения бесцветной жидкости.

Вычисляют расход раствора перманганата калия [c(KMnO₄) = 0,002 моль/дм³ (моль/л)] для исследуемой жидкости и воды, используемой в качестве сравнительной жидкости (холостой пробы). Разница между двумя значениями не должна превышать 1,5 см³ (мл).

A.4.2 Обнаружение ионов аммония

10 см³ (мл) экстракта подщелачивают 2 см³ (мл) раствора гидроксида натрия [c(NaOH) = 1 моль/дм³ (моль/л)], разбавляют дистиллированной водой до 15 см³ (мл), а затем добавляют 0,3 см³ (мл) реактива Несслера <5>.

--------------------------------

<5> См., например, Европейская фармакопея, ГФ XIII.

Одновременно готовят раствор сравнения, в 8 см³ (мл) стандартного раствора ионов аммония , добавляют 2 см³ (мл) гидроксида натрия [c(NaOH) = 1 моль/дм³ (моль/л)], разбавляют дистиллированной водой до 15 см³ (мл), а затем добавляют 0,3 см³ (мл) реактива Несслера.

Через 30 с исследуют раствор, который не должен быть более насыщенного желтого цвета, чем раствор сравнения.

A.4.3 Определение хлорид-ионов

Смешивают 0,3 см³ (мл) раствора нитрата серебра [c(AgNO₃) = 0,1 моль/дм³ (моль/л)] к 0,15 см³ (мл) разбавленной азотной кислоты. В полученный раствор добавляют 15 см³ (мл) экстракта.

Подготавливают раствор сравнения тем же способом, используя вместо экстракта 12 см³ (мл) стандартного раствора хлорид-ионов [5 мг Cl^- на дм³ (литр)] и 3 см³ (мл) воды.

Смесь встряхивают. Через 2 мин раствор, приготовленный с использованием экстракта, не должен быть более мутным, чем раствор сравнения. Избегают попадания прямых солнечных лучей на раствор.

A.4.4 Определение содержания металлов

A.4.4.1 Свинец и родственные ему тяжелые металлы

Металлы Ba, Cd, Cr, Cu, Pb, Sn и Al определяют методом атомно-спектрометрического анализа. Предел обнаружения с использованием атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС) может быть повышен путем концентрирования выпариванием испытуемой жидкости в соответствии с A.3, и в этом случае добавляют 2,5 см³ (мл) раствора соляной кислоты к 250 см³ (мл) испытуемой жидкости.

A.4.4.2 Альтернативные методы определения тяжелых металлов

Химическое определение общего содержания тяжелых металлов может быть использовано вместо атомно-спектрометрического определения металлов в экстракте, полученном согласно A.3.

1,2 см³ (мл) тиоацетамидного реагента добавляют к 12 см³ (мл) экстракта и 2 см³ (мл) буферного раствора ацетата аммония (pH = 3,5) и сразу же перемешивают.

Подготавливают раствор сравнения тем же способом, используя 10 см³ (мл) раствора свинца и добавив 2 см³ (мл) дистиллированной воды. Через 2 мин исследуют раствор. Он не должен быть более глубокого коричневого оттенка, чем сравнительный раствор.

A.4.5 Определение кислотности или щелочности

После добавления двух капель раствора фенолфталеина 10 см³ (мл) исследуемой жидкости не должны окрашиваться в красный цвет. Однако при добавлении менее 0,4 см³ (мл) гидроксида натрия [c(NaOH) = 0,01 моль/дм³ (моль/л)] должен появиться красный окрас. После добавления 0,8 см³ (мл) соляной кислоты [c(HCl) = 0,01 моль/дм³ (моль/л)] данный окрас должен снова исчезнуть. При добавлении пяти капель раствора метилового красного он должен приобрести красно-оранжевый цвет.

A.4.6 Определение (сухого) остатка испарением

Выпаривают 100 см³ (мл) экстракта на водяной бане и высушивают при температуре 105 °C до стабильной массы.

A.4.7 Определение мутности и степени опалесценции

A.4.7.1 Общая информация

Используют идентичные пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с плоским основанием и внутренним диаметром от 15 до 25 мм, сравнивают исследуемую жидкость с свежеприготовленной суспензией, как описано ниже. Глубина слоя составляет 40 мм. Сравнивают растворы при рассеянном дневном свете через 5 мин после приготовления контрольной суспензии, рассматривая их вертикально на черном фоне. Рассеяние света должно быть таким, чтобы контрольную суспензию 1 можно было легко отличить от воды, а контрольную суспензию 2 легко отличить от контрольной суспензии 1.

A.4.7.2 Реагенты

A.4.7.2.1 Раствор сульфата гидразина

Растворяют 1 г сульфата гидразина в воде и доводят объем до 100 см³ (мл). Дают настояться от 4 до 6 ч.

A.4.7.2.2 Раствор гексаметилентетрамина

Растворяют 2,5 г гексаметилентетрамина в 25 см³ (мл) воды в стеклянной колбе вместимостью 100 см³ (мл).

A.4.7.2.3 Первичная опалесцирующая суспензия

Добавляют к раствору гексаметилентетрамина (см. A.4.7.2.2) 25 см³ (мл) раствора сульфата гидразина (см. A.4.7.2.1). Смешивают и оставляют на 24 ч.

Данная суспензия стабильна в течение 2 мес при условии хранения в стеклянной упаковке без дефектов поверхности. Суспензия не должна прилипать к стеклу и должна быть хорошо перемешана перед использованием.

A.4.7.2.4 Образец опалесценции

Разбавляют 15 см³ (мл) первичной опалесцирующей суспензии (см. A.4.7.2.3) водой до 1000 см³ (мл).

Данная суспензия должна быть свежеприготовленной и храниться не более 24 ч.

A.4.7.2.5 Образцы суспензии сравнения

Подготавливают суспензии сравнения в соответствии с таблицей A.1. Смешивают и встряхивают перед использованием.

Таблица A.1

Образцы суспензии сравнения

Объемы в кубических сантиметрах (миллилитрах)

Образец суспензии	1	2	3	4
Образец опалесценции, объем	5	10	30	50
Вода, объем	95	90	70	50

A.4.7.3 Обработка результатов

A.4.7.3.1 Жидкость считается прозрачной, если ее чистота такая же, как у воды или используемого растворителя, при исследовании в условиях, описанных выше, или если ее опалесценция не более выражена, чем у образца суспензии 1.

A.4.7.3.2 Жидкость считается слегка опалесцирующей, если ее опалесценция является более выраженной, чем описано в A.4.7.3.1, но не более выраженной, чем у образца суспензии 2.

A.4.7.3.3 Жидкость считается опалесцирующей, если ее опалесценция является более выраженной, чем описано в A.4.7.3.2, но не более выраженной, чем у образца суспензии 3.

A.4.7.3.4 Жидкость является высокоопалесцирующей, если ее опалесценция более выражена, чем описано в A.4.7.3.3, но не более выраженной, чем у образца суспензии 4.

A.4.8 Определение цветности

A.4.8.1 Общая информация

Проверку цветности жидкостей в диапазоне коричнево-желто-красного проводят одним из двух методов, указанных в A.4.8.2 и A.4.8.3.

A.4.8.2 Метод 1

Используют две пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла, имеющие внутренний диаметр 12 мм, сравнивают 2 см³ (мл) исследуемой жидкости, в качестве раствора сравнения используют 2 см³ (мл) воды. Сравнивают интенсивность окраски при рассеянном дневном свете, рассматривая их горизонтально на белом фоне.

A.4.8.3 Метод 2

Используют пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла, имеющие внутренний диаметр 16 мм, сравнивают 10 см³ (мл) исследуемой жидкости с 10 см³ (мл) воды. Осматривают столбик жидкости вниз по вертикальной оси пробирки при рассеянном дневном свете на белом фоне.

A.4.8.4 Обработка результатов

Жидкость считается бесцветной, если она выдерживает сравнение с водой при исследовании в условиях, указанных в методе 1 или 2.

A.4.9 Определение УФ-поглощения

Определяют степень УФ-поглощения экстракта в кювете с длиной поглощающего слоя 1 см, используя раствор сравнения (холостую пробу). Поглощение определяют в диапазоне от 230 до 360 нм.

A.4.10 Определение ди(2-этилгексил)фталата (ДЭГФ) пластификатора в экстракте

Примечание - Данное определение применяют только к гибкому ПВХ, содержащему ДЭГФ.

A.4.10.1 Реагенты

A.4.10.1.1 Этанол, объемная доля в диапазоне от 95,1% до 96,6%, плотность в диапазоне от 0,805 0 до 0,812 3 г/см³ (г/мл).

A.4.10.1.2 Экстракционный растворитель, этанол: смесь воды, плотность от 0,937 3 до 0,937 8 г/см³ (г/мл) при определении пикнометром.

A.4.10.1.3 Ди(2-этилгексил)фталат (C₂₄H₃₈O₄), бесцветная маслянистая жидкость, не растворимая в воде, растворимая в органических растворителях; плотность в диапазоне от 0,982 до 0,986 г/см³ (г/мл), показатель преломления при температуре 20 °C для D-линии спектра натрия (589 нм) в диапазоне от 1,486 до 1,487.

A.4.10.2 Приготовление стандартных растворов

A.4.10.2.1 Раствор 1

Растворяют 1 г ДЭГФ (см. A.4.10.1.3) в этаноле (см. A.4.10.1.1) и доводят до объема 100 см³ (мл) этанолом.

A.4.10.2.2 Раствор 2

Разбавляют 10 см³ (мл) раствора 1 (см. A.4.10.2.1) до 100 см³ (мл) этанолом.

A.4.10.2.3 Контрольные растворы от A до E:

a) раствор A: разбавляют 20 см³ (мл) раствора 2 (A.4.10.2.2) до 100 см³ (мл) растворителем для экстракции (см. A.4.10.1.2) [содержание ДЭГФ: 20 мг/100 см³ (20 мг/100 мл)];

b) раствор B: разбавляют 10 см³ (мл) раствора от 2 до 100 см³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 10 мг/100 см³ (10 мг/100 мл)];

c) раствор C: разбавляют 5 см³ (мл) раствора от 2 до 100 см³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 5 мг/100 см³ (5 мг/100 мл)];

d) раствор D: разбавляют 2 см³ (мл) раствора от 2 до 100 см³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 2 мг/100 см³ (2 мг/100 мл)];

e) раствор E: разбавляют 1 см³ (мл) раствора от 2 до 100 см³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 1 мг/100 см³ (1 мг/100 мл)].

A.4.10.3 Калибровочный график

Измеряют оптическую плотность растворов (см. A.4.10.2.3) при 272 нм, используя экстракционный растворитель в качестве раствора сравнения, и строят график абсорбции в зависимости от концентрации ДЭГФ.

A.4.10.4 Процедура экстракции

Заполняют пустой пластиковый контейнер до половины номинального объема через трубку для сбора объемом экстракционного растворителя, нагретого до температуры 37 °C. Полностью удаляют воздух из пластикового контейнера и закрывают трубку для сбора. Погружают наполненный пластиковый контейнер в горизонтальном положении в водяную баню, поддерживаемую при температуре (37 +/- 1) °C, на (60 +/- 1) мин, не встряхивают. Снимают пластиковый контейнер с водяной бани, осторожно переворачивают его 10 раз и переносят содержимое в стеклянную колбу.

Измеряют максимальную оптическую плотность при 272 нм, используя экстракционный растворитель в качестве раствора сравнения.

A.4.10.5 Результаты

Определяют количество экстрагируемого ДЭГФ, сравнивают результат, полученный для пластикового контейнера (см. A.4.10.4) с калибровочным графиком поглощения для стандартных растворов лаборатории (см. A.4.10.3).