ГОСТ Р 59296-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Мука кормовая животного происхождения для производства кормов для непродуктивных животных. Технические условия

Приложение Б

(обязательное)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ГИСТАМИНА В КОРМОВОЙ МУКЕ

ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА КОРМОВ

ДЛЯ НЕПРОДУКТИВНЫХ ЖИВОТНЫХ

Б.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции гистамина разбавленным раствором хлорной кислоты, последующем центрифугировании и количественном определении методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с постколоночной дериватизацией о-фталальдегидом и флуориметрическим детектированием полученной производной.

Б.2 Требования к условиям измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия эксплуатации анализатора:

- температура окружающего воздуха от 18 °C до 25 °C;

- относительная влажность воздуха не менее 15% и не более 70% при температуре 25 °C, с линейным снижением до 50% при температуре 40 °C, без конденсации;

- атмосферное давление от 94,0 до 106,7 кПа (от 700 до 800 мм рт. ст.).

Б.3 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы

Хроматограф жидкостный высокоэффективный <*>, включающий:

--------------------------------

<*> Примером хроматографической системы, соответствующей описанным требованиям, может служить хроматограф Waters модели 2695 Alliance со сканирующим флуориметрическим детектором Waters модели 2475 и хроматографической колонкой Waters Sunfire C18 размером 4,6 x 150 мм, под управлением программного обеспечения для сбора и обработки данных Empower 2.

- насос градиентный для 2-компонентного (или более) градиента со встроенным дегазатором, предназначенный для подачи подвижной фазы со скоростью 1 см³/мин, предпочтительно оснащенный функцией автоматической промывки уплотнений;

- автосамплер, позволяющий дозировать пробу объемом 10 мкл, оснащенный термостатом, способным поддерживать температуру 15 °C;

- колонку длиной 150 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, с обращенной фазой C18 размером частиц 5,0 мкм;

- термостат колонок, обеспечивающий поддержание температуры 30 °C с точностью +/- 0,1°;

- детектор флуориметрический, позволяющий производить измерение при длине волны возбуждения 340 нм и длине волны эмиссии 445 нм;

- комплекс программно-аппаратный сбора и обработки данных.

Система постколоночной дериватизации <**>, состоящая из следующего оборудования:

--------------------------------

<**> Допускается использование специализированного оборудования для постколоночной дериватизации, например: системы постколоночной дериватизации Waters, состоящей из модуля постколоночной дериватизации (Post-Column Reaction Module), модуля контроля температуры (Temperature Control Module II) и насоса для подачи дериватизирующего раствора (Reagent Manager).

- насоса изократического, предназначенного для подачи дериватизирующего раствора со скоростью 0,6 см³/мин, предпочтительно оснащенного функцией автоматической промывки уплотнений;

- реактора для проведения дериватизации, представляющего собой капилляр из PEEK (полиэфирэфиркетон) пластика с внешним диаметром 1/16 дюйма, внутренним диаметром 0,18 мм, длиной 1,5 м и T-образный соединитель из PEEK (полиэфирэфиркетон) пластика для капилляров 1/16 дюйма.

Весы лабораторные специального класса точности (I) по ГОСТ Р 53228 с наибольшим пределом взвешивания 220 г, ценой деления 0,1 мг и пределом допускаемой абсолютной погрешности не более +/- 0,15 мг при нагрузке не более 50 г и не более +/- 0,3 мг при нагрузке свыше 50 г.

Весы лабораторные высокого класса точности (II) по ГОСТ Р 53228 с наибольшим пределом взвешивания 3000 г, ценой деления 0,01 г и пределом допускаемой абсолютной погрешности не более +/- 0,05 г.

Дозаторы пипеточные одноканальные с объемом дозирования от 20 до 200 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального +/- (1,5...2,0)%; с объемом дозирования от 100 до 1000 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального +/- 1,0%; с объемом дозирования от 1000 до 5000 мкл и пределом допускаемого относительного отклонения среднего арифметического значения фактического объема дозы от номинального +/- 1,0%.

Дозатор бутылочный с объемом дозирования от 5 до 50 см³ и пределом допускаемой относительной погрешности дозирования +/- 1,0%.

pH-метр универсальный любой марки.

Система вакуумной фильтрации растворителей.

Фильтры мембранные с размером пор 0,22 мкм для фильтрования растворителей, материал фильтра PVDF (поливинилиденфторид).

Фильтры шприцевые с размером пор 0,2 мкм, материал фильтра PTFE (политетрафторэтилен), со стекловолоконным префильтром.

Центрифуга лабораторная, обеспечивающая скорость центрифугирования 3800 об/мин.

Холодильник по ГОСТ 26678.

Шейкер орбитальный (аппарат для встряхивания проб) любой марки.

Ванна ультразвуковая лабораторная с регулятором времени.

Мешалка магнитная с регулированием скорости вращения.

Цилиндры градуированные 2-го класса точности, вместимостью 100, 1000, 2000 см³ по ГОСТ 1770.

Стаканы химические В-1-1000 и В-1-2000 по ГОСТ 25336.

Колбы мерные 1-го класса точности, вместимостью 5, 10, 50, 1000, 2000 см³ по ГОСТ 1770.

Колбы конические вместимостью 100 и 250 см³ по ГОСТ 25336.

Емкости из темного стекла вместимостью 1000 и 2500 см³ с закручивающейся крышкой.

Флаконы - виалы хроматографические стеклянные вместимостью 2,0 см³.

Шприцы инъекционные однократного применения стерильные вместимостью 5, 10 или 20 см³ по ГОСТ ISO 7886-1.

Пробирки центрифужные пластиковые с завинчивающийся крышкой вместимостью 50 см³.

Пленка парафиновая герметизирующая.

Бумага индикаторная универсальная (pH 0 - 12).

Мельница ультрацентробежная с ситом размером отверстий 0,75 мм.

Вода лабораторная для анализа по ГОСТ Р 52501, 1-й степени чистоты.

Гистамина дигидрохлорид с массовой долей основного вещества не менее 99%.

о-фталальдегид с массовой долей основного вещества не менее 97%.

2-меркаптоэтанол с массовой долей основного вещества не менее 99%.

Додециловый эфир трикозаэтиленгликоля, 30%-ный водный раствор.

Кислота хлорная, раствор с массовой долей 70%.

Кислота борная с массовой долей основного вещества не менее 99,8%.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, ч.д.а.

Ацетонитрил для ВЭЖХ.

Метанол для ВЭЖХ.

Кислота уксусная ледяная для ВЭЖХ.

Изопропанол для ВЭЖХ.

1-октансульфонат натрия с массовой долей основного вещества не менее 98%.

Ацетат натрия с массовой долей основного вещества не менее 99%.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов и материалов, по качеству не хуже указанных в настоящем стандарте.

Б.4 Отбор и подготовка проб

Б.4.1 Отбор проб - по ГОСТ 17681.

Б.4.2 Подготовка проб - по ГОСТ 17681-82 (пункт 1.3) со следующим дополнением.

Б.4.2.1 Выделенную пробу массой от 100 до 150 г измельчают на ультрацентробежной мельнице с ситом размером отверстий 0,75 мм и перемешивают.

Б.5 Подготовка к измерению

Б.5.1 Перед проведением испытаний реактивы и калибровочный раствор выдерживают при комнатной температуре не менее 1 ч.

Подготовку к работе оборудования (весы, жидкостный хроматограф, систему для проведения постколоночной дериватизации, орбитальный шейкер) проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации приборов.

При подготовке к работе хроматографа устанавливают температуру автосамплера на 15 °C и температуру колонки на 30 °C.

Подключают противоположные стороны T-образного соединителя к выходу с хроматографической колонки и к выходу с изократического насоса. Третий выход (перпендикулярный двум другим) подключают к детектору через капилляр, служащий реактором. T-образный соединитель и реактор помещают в термостат для колонки.

Хроматографическую систему промывают подвижной фазой в течение не менее 30 мин, постепенно увеличивая скорость потока от 0,4 до 1,0 см³/мин.

При подготовке к работе системы постколоночной дериватизации устанавливают скорость потока дериватизирующего раствора 0,6 см³/мин. Проверяют pH раствора, выходящего из насоса, с помощью индикаторной бумаги - pH должен быть более 10 для полноты протекания реакции дериватизации. Систему промывают не менее 60 мин.

Б.5.2 Приготовление растворов

Б.5.2.1 Приготовление исходного раствора гистамина

Для приготовления калибровочных растворов гистамина сначала готовят исходный раствор с концентрацией ~1000 мг/дм³. Для этого в мерную колбу вместимостью 50 см³ взвешивают необходимое количество соли гистамина в соответствии с таблицей Б.1 (точность взвешивания - +/- 0,005 г) с записью результата до четвертого десятичного знака и добавляют небольшое количество воды для лабораторного анализа (20 см³). Визуально проверяют растворение соли, при наличии нерастворенного осадка растворение проводят в ультразвуковой ванне. Доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Таблица Б.1

Наименование соли	Масса навески соли гистамина, г	Молярная масса соли гистамина, г/моль	Молярная масса гистамина (основания), г/моль	Чистота реактива, %
Гистамина дигидрохлорид	0,0828	184,07	111,15	>= 99

Раствор хранят в колбе с притертыми пробками в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C не более 3 мес.

Примечание - При расчете концентрации исходного раствора учитывают содержание основного вещества в реактиве.

Точную концентрацию гистамина в исходном растворе C_и.р, мг/дм³, рассчитывают по формуле

, (Б.1)

где m_с - масса навески соли гистамина, г;

M_осн - молярная масса гистамина (основания), г/моль;

P - чистота реактива (содержание основного вещества), %;

M_с - молярная масса соли гистамина, г/моль;

0,05 - объем колбы для разведения, дм³.

Б.5.2.2 Приготовление промежуточного раствора гистамина

Для приготовления промежуточного раствора гистамина с концентрацией 40 мг/дм³ в мерную колбу вместимостью 50 см³ с помощью пипеточного дозатора вносят 2 см³ исходного раствора гистамина, доводят объем раствора до метки 0,6 н раствором хлорной кислоты по Б.5.2.4 и перемешивают.

Раствор хранят в колбе с притертой пробкой в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C не более 14 сут.

Точную концентрацию гистамина в промежуточном растворе C_п.р, мг/дм³, рассчитывают по формуле

, (Б.2)

где C_и.р - концентрация гистамина в исходном растворе, мг/дм³;

2 - объем исходного раствора, см³;

50 - объем раствора после разведения, см³.

Б.5.2.3 Приготовление калибровочных растворов гистамина

Для приготовления калибровочных растворов в мерные колбы вместимостью 10 см³ с помощью пипеточного дозатора вносят необходимое количество промежуточного раствора гистамина в соответствии с таблицей Б.2, доводят объем раствора до метки 0,6 н раствором хлорной кислоты по Б.5.2.4 и перемешивают.

Таблица Б.2

Калибровочный раствор	1	2	3	4	5
C_к.р, мг/дм³	0,4	1	4	10	20
V_п.р, мкл	100	250	1000	2500	5000

Растворы хранят в колбах с притертой пробкой в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C не более 7 сут.

Точную концентрацию гистамина в каждом калибровочном растворе C_к.р, мг/дм³, рассчитывают по формуле

, (Б.3)

где C_п.р - концентрация гистамина в промежуточном растворе, мг/дм³;

V_п.р - объем промежуточного раствора, взятый для разведения, мкл;

10 - объем раствора после разведения, см³.

Б.5.2.4 Приготовление экстрагирующего раствора

В качестве экстрагирующего раствора используют 0,6 н раствор хлорной кислоты. Для этого в мерную колбу вместимостью 1000 см³ приливают от 200 до 300 см³ воды, затем с помощью мерного цилиндра отмеривают 51,5 см³ 70%-ной хлорной кислоты и осторожно вливают в колбу, перемешивают. После охлаждения до комнатной температуры доводят объем до метки водой, перемешивают и гомогенизируют в ультразвуковой ванне 5 мин.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 7 сут.

Б.5.2.5 Приготовление ацетатного буфера

Взвешивают (2,15 +/- 0,05) г 1-октансульфоната натрия и (16,4 +/- 0,1) г ацетата натрия, помещают в мерный стакан вместимостью 1000 см³, добавляют 950 см³ воды и растворяют перемешиванием на магнитной мешалке. Доводят pH раствора до (4,5 +/- 0,1) добавлением ледяной уксусной кислоты. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, доводят объем раствора до метки водой и перемешивают. Затем раствор гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 5 мин и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм с использованием системы вакуумной фильтрации растворителей, отбросив первую порцию фильтрата.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 7 сут.

Б.5.2.6 Приготовление подвижной фазы A

Взвешивают (2,15 +/- 0,05) г 1-октансульфоната натрия и (8,2 +/- 0,1) г ацетата натрия, помещают в мерный стакан вместимостью 1000 см³, добавляют 950 см³ воды и растворяют перемешиванием на магнитной мешалке. Доводят pH раствора до (5,2 +/- 0,1) добавлением ледяной уксусной кислоты. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, доводят объем раствора до метки водой и перемешивают. Затем раствор гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 5 мин и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм с использованием системы вакуумной фильтрации растворителей, отбросив первую порцию фильтрата.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 7 сут.

Б.5.2.7 Приготовление подвижной фазы B

Смешивают 990 см³ ацетатного буфера по Б.5.2.5 и 510 см³ ацетонитрила (соотношение 66:34 по объему). Раствор тщательно перемешивают на магнитной мешалке в течение 5 мин, переливают в емкость из темного стекла и гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 5 мин.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 7 сут.

Б.5.2.8 Приготовление 50%-ного раствора гидроксида калия

В коническую колбу вместимостью 100 см³ взвешивают 25 г гидроксида калия, добавляют небольшими порциями 25 см³ воды и охлаждают раствор до комнатной температуры.

Раствор хранят в колбах с притертой пробкой в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C не более 1 мес.

Б.5.2.9 Приготовление боратного буфера

Взвешивают (30,2 +/- 0,1) г борной кислоты в стакане вместимостью 1000 см³, добавляют 500 см³ воды и перемешивают на магнитной мешалке.

В стакане вместимостью 1000 см³ растворяют (26,2 +/- 0,1) г гидроксида калия в 400 см³ воды и охлаждают раствор до комнатной температуры.

К раствору борной кислоты приливают раствор гидроксида калия. Полностью растворяют борную кислоту при перемешивании на магнитной мешалке. Проверяют pH полученного раствора и, в случае необходимости, доводят pH до 10,5 - 11 добавлением 50%-ного раствора гидроксида калия по Б.5.2.8. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, доводят объем до метки водой и перемешивают. Затем раствор гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 5 мин и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм с использованием системы вакуумной фильтрации растворителей, отбросив первую порцию фильтрата.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 7 сут.

Б.5.2.10 Приготовление дериватизирующего раствора

В мерную колбу вместимостью 5 см³ взвешивают (0,200 +/- 0,001) г о-фталальдегида, доводят объем до метки метанолом и перемешивают. При необходимости раствор гомогенизируют в ультразвуковой ванне.

Мерным цилиндром отмеривают 1000 см³ боратного буфера по Б.5.2.9. В емкость из темного стекла вливают порцию боратного буфера (от 300 до 400 см³). С помощью пипеточного дозатора добавляют 3 см³ раствора додецилового эфира трикозаэтиленгликоля и 3 см³ 2-меркаптоэтанола, затем добавляют 5 см³ раствора о-фталальдегида и перемешивают. После этого добавляют оставшийся боратный буфер, снова перемешивают и гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 15 мин.

Раствор хранят в емкости из темного стекла в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C не более 4 сут.

Б.5.2.11 Приготовление раствора для промывки уплотнений насоса

Смешивают 900 см³ воды и 100 см³ изопропанола. Раствор перемешивают и гомогенизируют в ультразвуковой ванне в течение 5 мин.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 1 мес.

Б.5.3 Экстракция гистамина из пробы

В плоскодонную колбу вместимостью 250 см³ взвешивают (5 +/- 0,1) г гомогенизированной пробы с записью результата до четвертого десятичного знака. Допускается уменьшение массы навески до (1 +/- 0,1) г в том случае, если ожидается, что концентрация гистамина в пробе превышает концентрацию наиболее концентрированного калибровочного раствора (20 мг/дм³). Дозатором или мерным цилиндром добавляют 100 см³ экстрагирующего раствора по Б.5.2.4, закрывают колбу парафиновой пленкой и ставят на орбитальный шейкер на 45 мин при скорости 140 об/мин для проведения экстракции.

После этого пробу перемешивают до однородного состояния, переносят от 40 до 50 см³ экстракта в центрифужную пробирку и центрифугируют 10 мин при скорости 3800 об/мин.

С помощью шприца отбирают 2 см³ надосадочной жидкости и фильтруют в виалу через шприцевой фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Б.6 Проведение измерений

Б.6.1 Условия хроматографических измерений

Условия проведения измерений методом ВЭЖХ подбирают в зависимости от вида применяемого жидкостного хроматографа, флуориметрического детектора и хроматографической колонки.

В качестве примера могут быть приведены следующие условия определения гистамина, выполненные на системе ВЭЖХ с хроматографической колонкой C18; 4,6 x 150 мм; 5,0 мкм.

Разделение проводят в режиме градиентного элюирования (двухкомпонентная подвижная фаза).

Устанавливают следующие настройки хроматографической системы для проведения анализа:

скорость потока подвижной фазы - 1 см³/мин;

температура колонки - 30 °C;

температура внутри автосамплера - 15 °C;

скорость потока дериватизирующего раствора - 0,6 см³/мин;

температура дериватизации - 30 °C;

время разделения - 80 мин;

задержка между вводами пробы - 2 мин;

объем вводимой пробы - 10 мкл.

Градиент подвижной фазы устанавливают в соответствии с таблицей Б.3.

Таблица Б.3

Время, мин	Соотношение компонентов подвижной фазы
Время, мин	A, %	B, %
0	80	20
21	70	30
51	45	55
62	45	55
68	30	70
73	30	70
75	80	20
80	80	20

Б.6.2 Настройка флуориметрического детектора

Для флуориметрического детектора устанавливают следующие настройки:

длина волны возбуждения - 340 нм;

длина волны эмиссии - 445 нм.

Последовательность образцов должна включать следующие позиции:

бланк 1 (холостой опыт) - ввод раствора для экстракции для проверки чистоты посуды, реактивов и системы;

калибровочные растворы в порядке увеличения концентрации гистамина;

бланк 2 (холостой опыт) - ввод раствора для экстракции для проверки чистоты посуды, реактивов и системы;

анализируемые пробы - не более 10 инжекций.

Длительное время разделения - 80 мин - обусловлено необходимостью элюировать с колонки не только гистамин, но и другие биогенные амины и экстрагированные компоненты пробы. Примерное время удерживания гистамина и других биогенных аминов приведено в таблице Б.4.

Таблица Б.4

Биогенный амин	Время удерживания, мин
Тирамин	~31
Путресцин	~33
Кадаверин	~35
Гистамин	~38
Спермин	~58
Спермидин	~73

Б.6.3 Построение калибровочной зависимости

Калибровочная зависимость строится автоматически с помощью программно-аппаратного комплекса сбора и обработки данных при хроматографировании калибровочных растворов в каждой серии анализа.

Приготовленные по Б.5.2.3 калибровочные растворы подвергают ВЭЖХ анализу в условиях, выбранных в соответствии с Б.6.1, Б.6.2. Полученные хроматограммы обрабатывают с использованием компьютерной системы обработки данных хроматографа. Определяют абсолютное время удерживания гистамина.

С использованием средств программного обеспечения строят линейную зависимость площади пика гистамина от его концентрации в калибровочном растворе, рассчитанной по Б.5.2.3. При этом калибровочная зависимость должна принудительно проходить через нулевую точку, поэтому необходимо настроить соответствующие параметры обработки данных.

Полученный коэффициент корреляции калибровочной зависимости должен быть не менее 0,99. Значение невязок для каждой точки градуировки не должно превышать 20%.

Б.6.4 Выполнение измерений

Б.6.4.1 В виалы вместимостью 2 см³ вносят приготовленный по Б.5.3 экстракт пробы и проводят измерения на системе ВЭЖХ при условиях, указанных в Б.6.1, Б.6.2.

Б.6.4.2 Обработку хроматограмм осуществляют автоматически с помощью программно-аппаратного комплекса сбора и обработки данных по установленным критериям. После автоматической обработки оценивают правильность интегрирования пиков на хроматограммах анализируемых проб и, при необходимости, вносят коррективы.

Затем определяют времена удерживания проинтегрированных пиков, которые не должны отличаться от времен удерживания гистамина в калибровочных растворах более чем на 2% с максимальным отклонением 1 мин.

Содержание гистамина, мг/дм³, в анализируемых пробах рассчитывают по калибровочной зависимости, полученной по Б.6.3.

Б.6.4.3 Если содержание гистамина в виале превышает концентрацию наиболее концентрированного калибровочного раствора (20 мг/дм³), необходимо разбавить экстракт экстрагирующим раствором по Б.5.2.4 и повторить определение. Для этого непосредственно перед анализом необходимо разбавить экстракт так, чтобы концентрация попала в середину диапазона калибровки (в 2 - 5 раз).

Необходимое количество экстрагирующего раствора для разбавления рассчитывают по следующим формулам:

; (Б.4)

V₄ = V₂ - V₃, (Б.5)

где V₃ - объем экстракта для разбавления, см³;

V₂ - конечный объем экстракта в виале, см³ (должен находиться в диапазоне 1,8 - 1,5 см³);

n - количество раз, в которое необходимо разбавить исходный экстракт;

V₄ - объем экстрагирующего раствора (Б.5.2.4) для разбавления, см³.

Пример расчета - Для образца получена концентрация гистамина в виале, равная 30 мг/дм³. Для того чтобы попасть в диапазон калибровки, необходимо разбавить образец 3 раза. Для этого в пустую виалу с помощью пипеточного дозатора отбирают 0,5 см³ экстракта и добавляют 1,0 см³ экстрагирующего раствора (Б.5.2.4). Финальный объем экстракта в виале - 1,5 см³.

Б.7 Обработка результатов

На основании полученных данных содержание гистамина C, мг/кг, в анализируемой пробе рассчитывают по формуле

, (Б.6)

где C_в - содержание гистамина в виале, мг/дм³;

m - масса навески, г;

V₁ - объем экстрагирующего раствора, см³;

V₂ - конечный объем экстракта в виале, см³;

V₃ - объем экстракта для разбавления, см³.

Примечание - Если не проводилось разбавление по Б.6.4.3, то принять V₂ = V₁ = 2 см³.

Б.8 Метрологические характеристики

Данный метод позволяет проводить измерения со следующими метрологическими характеристиками:

- предел количественного определения данного метода - 2 мг/кг;

- неопределенность результатов измерения при концентрации < 10 мг/кг - 60% при минимуме 2 мг/кг; при концентрации >= 10 мг/кг - 45%.

Б.9 Требования безопасности

Б.9.1 При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004, ГОСТ 12.1.018, ГОСТ 12.4.009 и электробезопасности при работе с электроприборами по ГОСТ 12.1.019.

Б.9.2 Помещение, в котором проводят испытания, должно быть снабжено приточно-вытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021. Чистота воздуха в рабочей зоне должна соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.005.

Б.9.3 Работу с химическими реактивами следует проводить в вытяжном шкафу.