ГОСТ 34592-2019. Межгосударственный стандарт. Продукты пищевые, продовольственное сырье. Методы определения содержания инсектоакарицидов

6.3 Подготовка к проведению анализа

6.3.1 Приготовление растворов

6.3.1.1 Приготовление подвижной фазы А

Для приготовления подвижной фазы А в мерную колбу вместимостью 1000 см³ вносят 315,0 мг формиата аммония, 1000 см³ деионизированной воды и 0,1 см³ муравьиной кислоты. Перемешивают и помещают в ультразвуковую баню на 3 мин.

Срок хранения при комнатной температуре - не более 2 мес.

6.3.1.2 Приготовление смеси ацетонитрил - толуол в объемном соотношении 3:1

В коническую колбу вместимостью 50 см³ вносят 37,5 см³ ацетонитрила и 12,5 см³ толуола, перемешивают.

Срок хранения при комнатной температуре - не более одной недели.

6.3.1.3 Приготовление 10%-ного раствора ацетонитрила в деионизированной воде

В коническую колбу вместимостью 50 см³ вносят 5 см³ ацетонитрила и 45 см³ деионизированной воды, перемешивают.

Срок хранения при комнатной температуре - не более одной недели.

6.3.2 Приготовление матричных градуировочных растворов

6.3.2.1 Приготовление исходных растворов C₀ стандартов фентиона, темефоса, ацетамиприда, диазинона, имидаклоприда, индоксакарба, циромазина, тетраметрина, хлорпирифоса с массовыми концентрациями 100 мкг/см³

Для приготовления исходных стандартных растворов инсектоакарицидов C₀ рассчитывают необходимую массу i-го вещества, m_i, эквивалентную 10,0 мг, с учетом содержания основного вещества для каждого определяемого аналита по формуле

(1)

где 10 - исходная масса определяемого аналита, мг;

P_i - массовая доля основного вещества в i-м стандартном образце, %.

В мерные колбы вместимостью 100 см³ по отдельности вносят рассчитанные массы стандартов инсектоакарицидов (взвешивание проводят с точностью до первого десятичного знака) и приливают по 80 см³ ацетона. Перемешивают и помещают в ультразвуковую баню на 5 мин в режиме перемешивания, после чего доводят полученный раствор до метки ацетоном.

Срок хранения растворов при температуре от минус 15 °C до минус 25 °C - не более одного года.

Перед применением растворы выдерживают при температуре от 20 °C до 25 °C не менее 30 мин.

6.3.2.2 Приготовление рабочего стандартного раствора C₁ с массовыми концентрациями фентиона, темефоса, ацетамиприда 1,0 мкг/см³, диазинона, имидаклоприда 2 мкг/см³, индоксакарба 5 мкг/см³, циромазина, тетраметрина, хлорпирифоса 10 мкг/см³

Для приготовления рабочего стандартного раствора C₁ в мерную колбу вместимостью 10 см³ отбирают исходные растворы C₀: по 1,0 см³ циромазина, тетраметрина, хлорпирифоса; 0,5 см³ индоксакарба; по 0,2 см³ диазинона, имидаклоприда; по 0,1 см³ фентиона, темефоса, ацетамиприда. Доводят объем раствора ацетоном до 10 см³ по метке.

6.3.2.3 Приготовление рабочего стандартного раствора C₂ с массовыми концентрациями фентиона, темефоса, ацетамиприда 0,1 мкг/см³, диазинона, имидаклоприда 0,2 мкг/см³, индоксакарба 0,5 мкг/см³, циромазина, тетраметрина, хлорпирифоса 1 мкг/см³

Для приготовления рабочего стандартного раствора C₂ в мерную колбу вместимостью 10 см³ отбирают 1,0 см³ раствора C₁. Доводят объем раствора ацетоном до 10 см³ по метке, перемешивают и помещают в ультразвуковую баню на 3 мин.

Растворы C₁ - C₂ хранят при температуре от минус 15 °C до минус 25 °C не более 6 мес.

Перед применением растворы выдерживают при температуре от 20 °C до 25 °C не менее 30 мин.

6.3.2.4 Приготовление матричных градуировочных растворов G₁ - G₅

Матричные градуировочные растворы G₁ - G₅ готовят в полипропиленовых пробирках вместимостью 15 см³ из "чистых" проб массой 1,0 г, в которые вносят рабочие растворы определяемых аналитов C₁ - C₂ в соответствии с таблицей 6.1.

Таблица 6.1

Приготовление матричных градуировочных

растворов G₁ - G₅

Обозначение матричного градуировочного раствора	Вносимый объем рабочего раствора, см³
Обозначение матричного градуировочного раствора	C₁ (6.3.2.2)	C₂ (6.3.2.3)
G₁	0,10	-
G₂	0,05	-
G₃	0,02	-
G₄	-	0,10
G₅	-	0,05

Пробирки выдерживают при комнатной температуре в течение 10 мин и проводят дальнейшую обработку растворов согласно 6.4.

Массовые концентрации матричных градуировочных растворов G₁ - G₅ приведены в таблице 6.2.

Таблица 6.2

Аналит	Обозначение и массовая концентрация матричного градуировочного раствора (мкг/см³)
Аналит	G₁	G₂	G₃	G₄	G₅
Фентион Темефос Ацетамиприд	0,1	0,05	0,02	0,01	0,005
Диазинон Имидаклоприд	0,2	0,10	0,04	0,02	0,010
Индоксакарб	0,5	0,25	0,10	0,05	0,025
Циромазин Тетраметрин Хлорпирифос	1,0	0,50	0,20	0,10	0,050

Срок хранения растворов G₁ - G₅ при температуре от 2 °C до 8 °C - не более 7 сут.

6.3.3 Условия хроматографического разделения

6.3.3.1 Хромато-масс-спектрометр включают в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации и устанавливают параметры рабочих режимов масс-спектрометрического детектирования и хроматографического разделения.

6.3.3.2 Например, для колонки длиной 100 мм, диаметром 1 мм, с обращенно-фазным сорбентом с диаметром частиц не более 1,7 мкм соблюдают следующие условия хроматографического анализа:

- температура колонки - 30 °C;

- скорость потока подвижной фазы - 0,1 см³/мин;

- объем вводимой пробы - 10 мм³.

6.3.3.3 Разделение проводят в режиме градиентного элюирования (приготовление подвижной фазы А по 6.3.1.1, в качестве подвижной фазы Б используют ацетонитрил).

6.3.3.4 Условия хроматографического разделения в положительном режиме ионизации приведены в таблице 6.3.

Таблица 6.3

Время, мин	Подвижная фаза А, %	Подвижная фаза Б, %
0,0	100	-
0,5	100	-
5,0	20	80
6,0	-	100
8,0	-	100
8,1	100	-
18,0	100	-

6.3.3.5 Параметры настройки масс-спектрометрического детектора в положительном режиме ионизации:

- напряжение в источнике - 400 В;

- напряжение на капилляре - 1000 В;

- давление азота в распылителе - 400 кПа;

- скорость газа осушения - 4 дм³/мин;

- температура газа осушения - 200 °C;

- температура распылителя - 350 °C;

- высокочастотное напряжение на воронке - 400 В;

- амплитуда напряжения ВЧ - 400 В;

- амплитуда напряжения ВЧ ячейки соударений - 600 В.

6.3.3.6 Параметры источника электрораспыления в положительном режиме ионизации приведены в таблице 6.4.

Таблица 6.4

Временной интервал, мин	Амплитуда напряжения ВЧ охладителя ионов, В	Время транспортировки, мкс	Время накопления ионов, мкс	Скорость сканирования/режим сканирования, Гц
0,5 - 8,0	35 - 70 1/1	35 - 50 1/1	10	2

6.3.3.7 Параметры воздействия на ионы для получения ионов фрагментов определяемых инсектоакарицидов приведены в таблице 6.5.

Таблица 6.5

Аналит	Ион-предшественник, m/z	Ион-продукт, m/z	Время удерживания, мин	Энергия соударений, эВ
Тетраметрин	332,185	164,071/135,117	7,00 +/- 0,15	20 - 40 1/1
Циромазин	167,104	125,083	3,60 +/- 0,15
Хлорпирифос	349,933	197,927/199,924	7,10 +/- 0,15
Индоксакарб	528,078	293,031/218,042	6,60 +/- 0,15
Имидаклоприд	256,058	175,098/209,058	4,10 +/- 0,15
Диазинон	305,108	169,079/153,103	6,40 +/- 0,15
Фентион	279,027	169,0144/274,000	(5,42 - 6,32) +/- 0,15
Темефос	466,997	404,977/248,979	(6,31 - 6,98) +/- 0,15
Ацетамиприд	223,074	126,011	4,20 +/- 0,15
Примечание - Приведенные выше параметры хроматографического разделения и масс-спектрометрического детектирования могут отличаться в зависимости от используемого оборудования.

6.3.3.8 Контроль чувствительности масс-спектрометра осуществляют введением 10 мм³ градуировочного раствора G₁ (6.3.2.4) в инжектор хроматографа. Полученное соотношение сигнал/шум для каждого аналита должно быть не менее 50.

6.3.4 Установление градуировочной характеристики

6.3.4.1 Установление и расчет градуировочной характеристики проводят в каждой серии анализов с помощью программного обеспечения масс-спектрометра в автоматическом режиме по наиболее интенсивному ион-продукту.

6.3.4.2 Проводят измерения не менее трех матричных градуировочных растворов каждой концентрации, приготовленных по 6.3.2.4, в порядке возрастания их концентраций. Время удерживания определяемых соединений приведено в таблице 6.5.

6.3.4.3 В целях контроля стабильности градуировочной характеристики вместе с градуировочными растворами проводят дополнительное измерение "чистой" пробы с добавкой анализируемых соединений на градуировочном уровне G₂.

6.3.4.4 Градуировочную характеристику устанавливают в координатах "отношение площади пика определяемого инсектоакарицида" - "массовая концентрация определяемого инсектоакарицида". При установлении градуировочной характеристики используют линейную функцию вида y = a + bx, при этом коэффициент корреляции должен быть не менее 0,98.