ГОСТ Р 58138-2018. Национальный стандарт Российской Федерации. Удобрения органические. Методы паразитологического анализа. Методы определения личинок синантропных мух

12 Метод исследования почвы на наличие личинок и куколок синантропных мух

 

Исследование почвы на наличие личинок и куколок синантропных мух проводят на разном удалении от животноводческих помещений, навозохранилищ, на пастбище и в других местах с поверхности и на различной глубине. Помещают 25 г анализируемой пробы почвы, отобранной по 6.4, в центрифужные пробирки вместимостью от 80 до 100 см³ и заливают 3%-ным раствором едкого натрия или калия в соотношении 1:1.

Содержимое пробирок тщательно размешивают при помощи электромешалки или стеклянных палочек, отстаивают в течение от 20 до 30 мин, затем центрифугируют на протяжении 5 мин при 800 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а почву промывают водой от одного до пяти раз в зависимости от типа почвы (для песчаных и супесчаных почв достаточно одной промывки, для глинистых, суглинистых, черноземных - от двух до пяти раз) до получения прозрачной жидкости.

После промывки к почве добавляют 45 см³ насыщенного раствора натрия нитрата, тщательно размешивают и центрифугируют в течение 3 мин. При отсутствии натрия нитрата можно использовать раствор магния сульфата. После центрифугирования пробирки со смесью ставят в штатив и осторожно доливают раствор натрия нитрата до образования выпуклого мениска, а затем покрывают предметными стеклами размером 10 x 6 см, предварительно обезжиренными смесью спирта с эфиром (в соотношении 1:2) или прокипяченными в воде со щелочью или стиральным порошком. Смесь в пробирках отстаивают в течение 30 мин.

Во время отстаивания личинки и куколки синантропных мух всплывают на поверхность и прилипают к стеклу. Затем стекла снимают, а на их место ставят чистые. На снятые стекла наносят несколько капель 50%-ного водного раствора глицерина, капли накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Затем просматривают вторые стекла.

Для обнаружения личинок и куколок синантропных мух предметные стекла просматривают при увеличении от 40 до 60 раз (окуляр 10^x, объектив 4 - 6), а для определения степени развития, жизнеспособности и степени деформации - при увеличении в 100 раз (окуляр 10^x, объектив 10). Подсчитанное в двух предметных стеклах количество личинок и куколок синантропных мух дает характеристику степени загрязнения или обсемененности разных проб почвы личинками синантропных мух.