ГОСТ Р 58138-2018. Национальный стандарт Российской Федерации. Удобрения органические. Методы паразитологического анализа. Методы определения личинок синантропных мух

10 Методы определения жизнеспособности личинок синантропных мух

 

10.1 Визуальный осмотр, световая микроскопия и оценка подвижности

 

Для личинок синантропных мух 1-го, 2-го и 3-го возраста двигательная активность при температуре от 15 °C до 40 °C остается главным признаком их жизнеспособности. Подвижность личинок синантропных мух устанавливают слабым подогревом препарата на предметном или часовом стекле. Погибшими считают личинки, если они выпрямлены, неподвижны, имеют разрушенные структуры, деформированные оболочки.

У куколок синантропных мух при осмотре под лупой или микроскопом выявляют резко выраженные признаки гибели зародыша: нарушение целостности и деформация оболочек, прогибание оболочек внутрь, разрушение оболочек и зародыша.

 

10.2 Культивирование

 

Собранных при анализе проб навоза личинок разного возраста и куколок синантропных мух двукратно отмывают в дистиллированной воде и помещают в чашки Петри по ГОСТ 25336. Личинок 1-го и 2-го возраста определяют по их длине и культивируют вместе, добавляя в чашку Петри пищевой субстрат, в термостате при температуре от 38 °C до 45 °C и влажности от 60% до 80%. Для доступа кислорода два раза в день чашки Петри достают из термостата и открывают крышки для аэрации. Личинки быстро растут, дважды линяют, становясь личинками 3-го возраста, их длина составляет от 1 до 2 см, тело беловато-серого цвета, и они подвижные.

Собранные при анализе навоза личинки 3-го возраста также культивируют в термостате в чашках Петри с пищевым субстратом при отмеченной ранее температуре и влажности, проводя аэрацию. Личинки 3-го возраста проходят питающуюся фазу, достигая в длину от 1 до 2 см, они подвижные, затем становятся малоподвижными, проходят предкукольную (непитающуюся) фазу.

На этой фазе для окукливания их необходимо перемещать в сухие чашки Петри и культивировать в термостате при температуре от 20 °C до 25 °C и влажности от 20% до 40%.

Вышедшие из пупария мухи сразу не летают. Примерно 1 мин они сидят неподвижно, затем начинают быстро бегать, потом снова становятся неподвижными и только через 1,5 - 2 ч начинают подвижный образ жизни. Самки, как правило, выходят из яиц на 12 - 24 ч позднее, чем самцы. Кладки яиц молодыми самками при благоприятных условиях осуществляются через 9 - 12 сут.

Имаго синантропных мух, полученные после культивирования личинок разного возраста и куколок, являются материалом для их видовой идентификации с использованием соответствующего определителя <*>.

--------------------------------

<*> См. [4].