ГОСТ Р 58138-2018. Национальный стандарт Российской Федерации. Удобрения органические. Методы паразитологического анализа. Методы определения личинок синантропных мух

9 Методы определения количества личинок и куколок синантропных мух в навозе

 

9.1 Определения количества личинок и куколок синантропных мух при визуальном осмотре

 

Анализируемую пробу навоза массой 10 г по частям перемещают в чашки Петри, просматривают под лупой или микроскопом, перебирая содержимое препаравальной иглой и пинцетом. При этом находят яйца, личинки разного возраста и куколки синантропных мух, их собирают отдельно, подсчитывают количество и используют для культивирования и видовой идентификации.

9.1.1 Обработка результатов

При обнаружении в 10 г анализируемой пробы навоза не более 100 личинок синантропных мух следует признать наличие небольшого количества имаго мух на территории животноводческих ферм и населенных пунктов. Установлено, что в популяции синантропных мух на долю имаго мух приходятся 20%, а на долю личинок разного возраста и куколок - 80%.

Наличие от 101 до 500 личинок синантропных мух в 10 г навоза свидетельствует о среднем количестве имаго мух на территории животноводческих ферм.

Наличие от 501 до 1000 личинок синантропных мух в 10 г навоза свидетельствует о большом количестве имаго мух на территории животноводческих ферм.

Наличие более 1000 личинок синантропных мух в 10 г анализируемого навоза свидетельствует об очень большом количестве имаго мух на территории животноводческих ферм и населенных пунктов и указывает на необходимость мер борьбы как с личинками, так и с имаго синантропных мух. Навоз, содержащий такое большое количество личинок синантропных мух, необходимо обрабатывать одним из ларвицидных препаратов.

 

9.2 Учет численности имаго мух - косвенный метод определения количества личинок синантропных мух

 

Для учета численности имаго синантропных мух используют стандартные липкие ленты, которые в своем составе кроме клеевой основы содержат феромоны и аттрактанты. Липкие ленты-мухоловы размещают на 24 ч из расчета на 20 м²/шт. на территории животноводческих ферм (внутри и возле), навозохранилищ и в населенных пунктах один раз в 10 дней на разной высоте - 1 и 2 м от земли, пола и навозной кучи. Для учета численности преимагинальной стадии синантропных мух берут пробы (от 6 до 10 проб из помещения) из содержимого пола животноводческих помещений массой 10 г с помощью шпателя и кисточки, которые помещают в мини-контейнеры с завинчивающейся крышкой и доставляют в лабораторию для анализа.

Анализ полученного материала позволяет характеризовать общую численность синантропных мух и степень санитарного благополучия (неблагополучия) животноводческих ферм (помещений и территории), а также навозохранилищ.

 

9.3 Определение количества яиц и личинок синантропных мух 1-го и 2-го возраста с помощью счетных камер

 

9.3.1 Определение количества личинок синантропных мух с помощью счетной камеры Горяева

Размешивают 1 г навоза в стакане с 15 см³ дистиллированной воды и тщательно гомогенизируют. Полученную суспензию фильтруют через сито, 10 см³ фильтрата помещают в центрифужную пробирку и центрифугируют с частотой вращения 2000 об/мин в течение 2 мин. Затем жидкость из пробирки сливают, а к осадку добавляют 10 см³ флотационного раствора хлористого натрия, тщательно перемешивают и используют для заполнения счетной камеры Горяева.

При отсутствии счетной камеры используют предметное стекло, на которое наносят 0,15 см³ суспензии и накрывают покровным стеклом.

Заполненную камеру Горяева или предметное стекло выдерживают в течение 2 мин, чтобы личинки мух могли подняться к поверхности, и под микроскопом подсчитывают количество личинок мух. Полученное число, умноженное на 100, показывает содержание личинок мух в 1 г навоза. Для более точного определения количества личинок мух используют две-три камеры.

9.3.2 Определение количества личинок синантропных мух с помощью счетной камеры ВИГИСа

Размешивают 1 г навоза в ступке с 5 см³ флотационного раствора аммиачной селитры и тщательно перемешивают пестиком. По мере размешивания добавляют флотационный раствор и доводят до объема 15 см³. Взвесь фильтруют через ситечко в чистый стакан с последующим отжимом содержимого в ситечко и тщательным размешиванием взвеси. Затем пастеровской пипеткой быстро переносят 0,5 см³ взвеси в одну из ячеек счетной камеры и оставляют на 2 мин, после чего подсчитывают количество личинок мух. При необходимости заполняют и другие ячейки взвесью пробы из того же стаканчика, но при этом каждый раз перед заполнением ячейки смесь перемешивают.

Подсчет личинок мух в ячейке проводят с помощью микроскопа при искусственном освещении.

Для установления количества личинок синантропных мух в 1 г навоза делают расчет по числу обнаруженных личинок мух в одной, двух или четырех ячейках. Для этого число личинок мух, выявленных в ячейке, умножают на 30, в двух ячейках - на 15, а в четырех - на 7,5.