ГОСТ 33809-2016. Межгосударственный стандарт. Мясо и мясные продукты. Определение сорбиновой и бензойной кислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

8 Подготовка к анализу

 

8.1 Приготовление растворов

 

8.1.1 Приготовление градуировочных растворов

Для определения сорбиновой и бензойной кислот и их солей готовят градуировочные растворы массовой концентрации 1,0 мг/см³ (раствор 1), 0,5 мг/см³ (раствор 2), 0,2 мг/см³ (раствор 3), 0,1 мг/см³ (раствор 4).

Для приготовления раствора 1 взвешивают 100,0 мг сорбиновой кислоты и 100,0 мг бензойной кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, добавляют 70 - 80 см³ дистиллированной воды, тщательно перемешивают на ультразвуковой бане в течение 10 - 15 мин до полного растворения и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Для приготовления раствора 2 градуированной пипеткой отбирают 10 см³ раствора 1, переносят в колбу вместимостью 50 см³ и разбавляют 10 см³ дистиллированной воды.

Для приготовления раствора 3 градуированной пипеткой отбирают 10 см³ раствора 1, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Для приготовления раствора 4 градуированной пипеткой отбирают 5 см³ раствора 1, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Растворы готовят перед использованием.

8.1.2 Приготовление 2%-ного раствора трихлоруксусной кислоты

Взвешивают 2,0 г трихлоруксусной кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в дистиллированной воде, доводят объем водой до метки и перемешивают.

Раствор помещают в коническую колбу с притертой пробкой и хранят при комнатной температуре не более 1 мес.

8.1.3 Приготовление подвижной фазы хроматографической системы

В качестве подвижной фазы используют буферный раствор фосфорнокислого калия однозамещенного молярной концентрации c (KH₂PO₄) = 0,025 моль/дм³ с pH = 3,4 ед. pH (фосфатный буфер).

Для приготовления фосфатного буфера взвешивают 3,4 г фосфорнокислого калия однозамещенного, растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, доводят объем до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. С помощью градуированной пипетки добавляют по каплям ортофосфорную кислоту, доводя pH до 3,4 ед. pH.

Перед использованием раствор дегазируют на ультразвуковой бане в течение 10 - 15 мин.

Готовый раствор хранят в колбах с притертыми пробками при комнатной температуре не более 7 сут.

 

8.2 Приготовление экстракта пробы

 

Пробу массой 10 г по 7.2 взвешивают с записью результата до второго десятичного знака, помещают в центрифужную пробирку вместимостью 50 см³, добавляют 30 см³ 2%-ного раствора трихлоруксусной кислоты и тщательно гомогенизируют. Гомогенат выдерживают на ультразвуковой бане при температуре 20 °C в течение 15 мин, а затем центрифугируют 5 мин с центробежным ускорением 4000g. Полученный супернатант пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм в хроматографическую виалу вместимостью 2 см³.