ГОСТ 33808-2016. Межгосударственный стандарт. Мясо и мясные продукты. Определение лимонной кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

8 Подготовка к анализу

 

8.1 Приготовление растворов

8.1.1 Приготовление градуировочных растворов

Для определения лимонной кислоты и ее солей готовят градуировочные растворы лимонной кислоты массовой долей: 1,0 г/100 см³ (раствор 1); 0,5 г/100 см³ (раствор 2); 0,2 г/100 см³ (раствор 3); 0,1 г/100 см³ (раствор 4); 0,05 г/100 см³ (раствор 5).

Для приготовления раствора 1 взвешивают 1,00 г лимонной кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, добавляют 99 см³ дистиллированной воды, тщательно перемешивают до полного растворения.

Для приготовления раствора 2 градуированной пипеткой отбирают 10 см³ раствора 1, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и разбавляют 10 см³ дистиллированной воды.

Для приготовления раствора 3 градуированной пипеткой отбирают 10 см³ раствора 1, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Для приготовления раствора 4 градуированной пипеткой отбирают 5 см³ раствора 1, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Для приготовления раствора 5 градуированной пипеткой отбирают 10 см³ раствора 4, переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и разбавляют 10 см³ дистиллированной воды.

Растворы готовят перед использованием.

8.1.2 Приготовление 2%-ного раствора трихлоруксусной кислоты

Взвешивают 2,0 г трихлоруксусной кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в дистиллированной воде, доводят объем водой до метки и перемешивают.

Раствор хранят в колбе с притертой пробкой при комнатной температуре не более 1 мес.

8.1.3 Приготовление подвижной фазы хроматографической системы

В качестве подвижной фазы используют фосфатный буферный раствор с pH = 6,0 ед. pH (фосфатный буфер).

Для приготовления фосфатного буфера взвешивают 13,6 г фосфорнокислого калия однозамещенного, растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, доводят объем до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. С помощью градуированной пипетки добавляют по каплям раствор гидроокиси калия молярной концентрации 10 моль/дм³, доводя pH до 6,0 ед. pH.

Перед использованием раствор дегазируют на ультразвуковой бане в течение 10 - 15 мин.

Готовый раствор хранят в колбах с притертыми пробками при комнатной температуре не более 7 сут.

8.1.4 Приготовление раствора гидроокиси калия молярной концентрации c(KOH) = 10 моль/дм³

56,1 г гидроокиси калия растворяют в дистиллированной воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой.

Раствор хранят при комнатной температуре не более 1 мес.

8.2 Приготовление экстракта пробы

Пробу массой 10 г взвешивают с записью результата до второго десятичного знака, помещают в центрифужную пробирку вместимостью 50 см³, добавляют 30 см³ 2%-ного раствора трихлоруксусной кислоты и гомогенизируют. Гомогенат выдерживают на ультразвуковой бане при температуре 20 °C в течение 15 мин, а затем центрифугируют 5 мин с центробежным ускорением 4000 g. Полученный супернатант пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм в хроматографическую виалу вместимостью 2 см³.