ГОСТ ISO 13366-1-2014. Межгосударственный стандарт. Молоко. Подсчет соматических клеток. Часть 1. Метод с применением микроскопа (контрольный метод)
Приложение B
(справочное)
ОКРАШИВАНИЕ КОЗЬЕГО МОЛОКА
B.1 Окрашивающие растворы для козьего молока [8]
B.1.1 Фиксатор Карнуа
B.1.1.1 Состав
Хлороформ | 60 см3 |
Уксусная кислота ледяная | 20 см3 |
100%-ный этиловый спирт | 120 см3 |
B.1.1.2 Приготовление
Последовательно добавляют хлороформ и безводную уксусную кислоту в этанол и тщательно перемешивают.
B.1.2 Окрашивающий раствор пиронина-Y и метилового зеленого
B.1.2.1 Состав
Пиронин-Y | 1,0 г |
Метиловый зеленый | 0,56 г |
Деминерализованная вода | 196 см3 |
B.1.2.2 Приготовление
Последовательно добавляют пиронин-Y и метиловый зеленый в колбу с деминерализованной водой и тщательно перемешивают. Фильтруют через фильтр (см. 5.2) и хранят в колбе из коричневого стекла. Перед использованием раствор снова фильтруют через фильтр (см. 5.2).
B.2 Приготовление мазка
Проводят окрашивание мазка на предметном стекле по следующей схеме:
1 Используют фиксатор Карнуа (см. B.1.1) в течение 5 мин.
2 Используют 50%-ный этанол в течение 1 мин.
3 Используют 30%-ный этанол в течение 1 мин.
4 Используют воду в течение 1 мин.
5 Используют окрашивающий раствор пиронина-Y и метилового зеленого в течение 6 мин.
6 Кратковременно промывают н-бутиловым спиртом и затем ксилолом.
7 Предметные стекла хранят в условиях защиты от пыли не более 12 мес.