ГОСТ Р ИСО 24362-3-2016. Национальный стандарт Российской Федерации. Материалы текстильные. Методы определения некоторых ароматических аминов, выделяемых из азокрасителей. Часть 3. Обнаружение использования некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол

Приложение A

(справочное)

ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ АНАЛИЗЫ

A.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография [ВЭЖХ (HPLC)]

Поскольку инструментальное оснащение (7.9) лабораторий может быть разным, для хроматографических анализов невозможно представить общие инструкции. Успешно испытаны и использованы следующие параметры.

A.2 Тонкослойная хроматография [ТСХ (TLC)]

A.2.1

Пластины (ВЭТСХ [HPTLC])...	силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F254, 20x10 см.
Применяемый объем................	от 2 до 5 мм³, наносится в виде капли.
Подвижный растворитель 1.....	хлороформ/уксусная кислота (90 + 10) частей на объем.
Проведение................................	насыщенная камера.
Детектирование........................	1. Пластины ТСХ (TLC) с флуоресцентным индикатором F254. 2. Ультрафиолетовая лампа и/или после последовательной обработки реактивом 1 и реактивом 2. Время реакции приблизительно 5 мин.
Реактив 1...................................	для NOx-образования в пустую камеру помещают стакан с приблизительно 1 см³ серной кислоты и добавляют небольшое количество твердого нитрита натрия. Закрывают камеру крышкой и проводят реакцию. В камеру помещают сухую пластину. Через 5 мин ее вынимают и сушат в потоке холодного воздуха.
Реактив 2.....................................	затем обрызгивают пластину 0,2%-ным раствором , приготовленного в растворе KOH в метаноле (c = 1 моль/дм³).

A.2.2

Пластины (ТСХ [TLC]).............	силикагель 60, 20x20 см² с флуоресцентным индикатором F254.
Применяемый объем................	10,0 мм³, наносится в виде линии.
Подвижный растворитель 2.....	хлороформ/этилацетат/уксусная кислота (60 + 30 + 10) частей на объем.
Подвижный растворитель 3...	хлороформ/метанол (95 + 5) частей на объем.
Подвижный растворитель 4...	н-бутилацетат/толуол (30 + 70) частей на объем.
Проведение..............................	насыщенная камера.
Подвижные растворители 2 и 3	один за другим без просушивания пластин.
Детектирование.........................	1. Пластины ТСХ (TLC) с флуоресцентным индикатором F254. 2. Ультрафиолетовая лампа и/или после последовательной обработки реактивом 1 и реактивом 2. Время реакции приблизительно 5 мин.

A.2.3

Пластины (ТСХ [TLC])............	силикагель 60, 20x20 см².
Применяемый объем...............	10,0 мм³, наносится в виде линии.
Подвижный растворитель 2...	хлороформ/этилацетат/уксусная кислота (60 + 30 + 10) частей на объем.
Подвижный растворитель 3...	хлороформ/метанол (95 + 5) частей на объем.
Подвижные растворители 2 и 3	один за другим без просушивания пластин.
Проведение.............................	насыщенная камера.
Детектирование.....................	последовательная обработка реактивами 1 и 2 (A.2.1), время реакции приблизительно 5 мин.

A.3 Высокоэффективная жидкостная хроматография [ВЭЖХ (HPLC)]

A.3.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография/фотометрический детектор с диодной матрицей [ВЭЖХ/ДМД (HPLC/DAD]

Элюент 1..................................	метанол.
Элюент 2..................................	растворяют 0,68 г дигидрофосфата калия в 1000 см³ воды, затем добавляют 150 см³ метанола.
Неподвижная фаза..................	Zorbax Eclipse XDB (3,5 мкм); 150x4,6 мм.
Скорость потока......................	от 0,6 до 2,0 см³/мин (градиент потока, см. ниже).
Температура колонки.............	32 °C.
Вводимый объем....................	5 мм³.
Детектирование.....................	фотометрический детектор с диодной матрицей [ДМД (DAD)].
Количественное определение...	при 240, 280, 305 и 380 нм.
Градиент..................................	Время, мин	Элюент 1, %	Поток, см³
	0,00	10,0	0,6
	22,50	55,0	0,6
	27,50	100,0	0,6
	28,50	100,0	0,95
	28,51	100,0	2,0
	29.00	100,0	2,0
	29.01	10,0	2,0
	31,0	10,0	0,6
	35,00	10,0	0,6

A.3.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография/масс-селективный детектор [ВЭЖХ/МС (HPLC/MS)]

Элюент 1.................................	ацетонитрил.
Элюент 2................................	5 ммоль ацетата аммония в 1 000 см³ воды, уровень pH = 3,0.
Неподвижная фаза.................	Zorbax Eclipse XDB (3,5 мкм), 2,1x50 мм.
Скорость потока.....................	300 мм³/мин.
Градиент.................................	начало 10% элюента 1, увеличение до 20% элюента 1 в течение 1,5 мин, линейное увеличение до 90% элюента 1 в течение 6 мин.
Температура колонки..............	40 °C.
Вводимый объем....................	2,0 мм³.
Детектирование.....................	квадрупольный детектор и/или детектор с ионной ловушкой в режиме сканирования и/или масс-спектрометрическое детектирование дочерних ионов.
Газ-спрей..................................	азот (в сосудах/генераторный).
Ионизация...............................	электрораспыление, положительное, по API, фрагментор 120 В.

A.4 Капиллярная газовая хроматография/масс-селективный детектор [ГХ/МС (GC/MS)]

Капиллярная колонка..............	DB-35-MS , длина 35 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
Система ввода..........................	с делением или без.
Температура инжектора.........	260 °C.
Газ-носитель...........................	гелий.
Температурная программа.....	100 °C (2 мин), от 100 °С до 310 °C (15 °C/мин), 310 °C (2 мин).
Вводимый объем....................	1,0 мм³, деление 1:15.
Детектирование......................	МС (MS).

A.5 Капиллярный электрофорез [КЭ (CE)]

200 мм³ раствора образца (8.4) смешивают с 50 мм³ HCl (c = 0,01 моль/дм³) и пропускают через мембранный фильтр (0,2 мкм). Этот раствор анализируют с помощью капиллярно-зонального электрофореза.

Капилляр 1..............................	56 см, без покрытия, внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя .
Капилляр 2...............................	56 см, покрытый поливиниловым спиртом [ПВС (PVA)], внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя .
Буферный раствор....................	фосфатный буферный раствор (c = 50 ммоль/дм³), уровень pH = 2,5.
Температура колонки...............	25 °C.
Напряжение..............................	30 кВ.
Время ввода.............................	4 с.
Время продувки.......................	5 с.
Детектирование.......................	ДМД (DAD) 214, 254 нм, спектрограф.
Количественное определение...	при 240 и 380 нм.

ГОСТ Р ИСО 24362-3-2016. Национальный стандарт Российской Федерации. Материалы текстильные. Методы определения некоторых ароматических аминов, выделяемых из азокрасителей. Часть 3. Обнаружение использования некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол

X - время, мин; Y - относительное содержание;

1 - внутренний стандарт; 2 - 4-аминоазобензол

Рисунок A.1 - Хроматограмма полного ионного тока

4-аминоазобензола, полученная на хроматомасс-спектрометре

[ГХ/МС (GC/MS)]

X - m/z (отношение массы к заряду иона);

Y - относительное содержание

Рисунок A.2 - Спектр ГХ/МС (70 электрон-вольт)

4-аминоазобензола

X - время, мин; Y - поглощение в а.е.м. (mAU)

1 - 240 нм; 2 - 380 нм

Рисунок A.3 - Хроматограмма 4-аминоазобензола,

полученная с помощью [ВЭЖХ/ДМД (HPLC/DAD)]

X - длина волны, нм; Y - поглощение, а.е.м. (mAU)

Рисунок A.4 - Спектр ВЭЖХ/ДМД (HPLC/DAD) 4-аминоазобензола