ГОСТ ISO 18416-2013. Межгосударственный стандарт. Продукция парфюмерно-косметическая. Микробиология. Обнаружение Candida albicans
5. Разбавители и питательные среды
5.1 Общие положения
Общие рекомендации приведены в ISO 21148. Если в настоящем стандарте упоминается вода, то это означает, что применяют дистиллированную или очищенную воду, как установлено в ISO 21148.
Бульон для обогащения используют для диспергирования пробы и для увеличения первоначальной микробной популяции. Он может содержать нейтрализаторы, если испытуемая проба обладает антимикробными свойствами. Проверка эффективности нейтрализации проводится в соответствии (см. раздел 11). Информация относительно подходящих нейтрализаторов приведена в приложении B.
Бульон для обогащения (5.3.3.1) или любая из сред, приведенных в приложении A, пригодны для обнаружения Candida albicans в соответствии с настоящим стандартом при условии, что они валидированы согласно разделу 11.
Можно использовать другие разбавители и питательные среды, если была продемонстрирована их пригодность.
5.2 Разбавитель для дрожжевой суспензии (раствор хлорида натрия с триптоном)
5.2.1 Общие положения
Разбавитель используется для приготовления дрожжевой суспензии, применяемой для процедуры валидации (см. раздел 11).
5.2.2 Состав
триптон, панкреатический гидролизат казеина - 1,0 г;
хлорид натрия - 8,5 г;
вода - 1000 см3.
5.2.3 Приготовление
Компоненты растворяют в воде, перемешивая при нагревании. Разливают раствор в лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения раствора pH должен быть равен 7,0 +/- 0,2 ед. pH при измерении при комнатной температуре.
5.3 Питательные среды
5.3.1 Общие положения
Питательные среды могут быть приготовлены, как указано ниже, или из готовых сухих питательных сред согласно инструкциям изготовителя. Должны соблюдаться инструкции поставщика среды.
Примечание - Готовые к употреблению среды можно использовать, если их состав и/или ростовые свойства сопоставимы с приведенными ниже.
5.3.2 Агаризованная среда для подтверждения
5.3.2.1 Декстрозный агар Сабуро (SDA)
Состав
- декстроза - 40,0 г;
- пептический перевар животной ткани - 5,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1000 см3.
Приготовление
Компоненты или готовую сухую среду растворяют в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH среды должен быть равен 5,6 +/- 0,2 ед. pH при измерении при комнатной температуре.
5.3.2.2 Другие агаризованные среды для валидации
Могут использоваться другие подходящие агаризованные среды (см. приложение A).
5.3.3 Бульон для обогащения
5.3.3.1 Бульон Eugon LT 100
Общие положения
Данная среда содержит ингредиенты: лецитин и полисорбат 80, которые нейтрализуют ингибирующие вещества, присутствующие в пробе, а также диспергирующий агент октоксинол 9.
Состав
- панкреатический гидролизат казеина - 15,0 г;
- папаиновый перевар соевой муки - 5,0 г;
- L-цистин - 0,7 г;
- хлорид натрия - 4,0 г;
- сульфит натрия - 0,2 г;
- глюкоза - 5,5 г;
- яичный лецитин - 1,0 г;
- полисорбат 80 - 5,0 г;
- октоксинол 9 - 1,0 г;
- вода - 1000 см3.
Приготовление
Последовательно растворяют компоненты (полисорбат, октоксинол 9 и яичный лецитин) в кипящей воде до их полного растворения. Остальные компоненты растворяют в воде, перемешивая их при нагревании. Разливают среду в лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH среды должен быть равен 7,0 +/- 0,2 ед. pH при измерении при комнатной температуре.
5.3.3.2 Другие бульоны для обогащения
Можно использовать и другие подходящие бульоны для обогащения (см. приложение A).
5.3.4 Селективная агаризованная среда для выделения Candida albicans
5.3.4.1 Декстрозный агар Сабуро с хлорамфениколом
Состав
- декстроза - 40,0 г;
- пептический перевар животной ткани - 5,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- хлорамфеникол - 0,050 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1000 см3.
Приготовление
Растворяют компоненты (включая хлорамфеникол) или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH среды должен быть равен 5,6 +/- 0,2 ед. pH при измерении при комнатной температуре.
5.3.4.2 Другие селективные агаризованные среды
Можно использовать другие селективные агаризованные среды (см. приложение A).
5.3.5 Кукурузный агар с 1%-ным полисорбатом 80
5.3.5.1 Состав
- кукурузный экстракт - 50,0 г;
- агар - 15,0 г;
- полисорбат 80 (ТВИН) - 10,0 г;
- вода - 1000 см3.
5.3.5.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH среды должен быть равен 6,0 +/- 0,2 ед. pH при измерении при комнатной температуре.
Подписаться на обновления