ГОСТ ISO/TS 17764-1-2015. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма. Определение содержания жирных кислот. Часть 1. Приготовление метиловых эфиров

6 Способ получения метиловых эфиров жирных кислот с четырьмя и более атомами углерода (метод KOH/HCl)

 

6.1 Сущность

Глицериды преобразуются в метиловые эфиры путем переэтерификации с метилатом калия в абсолютном метаноле. Свободные жирные кислоты этерифицируют раствором соляной кислоты в метаноле.

6.2 Реактивы

Все реактивы должны быть признанной аналитической степени чистоты.

6.2.1 Вода, соответствующая степени чистоты 3 ISO 3696.

6.2.2 Гептадекановая кислота (внутренний стандарт), с содержанием основного вещества не менее 99%.

6.2.3 н-гексан или н-гептан.

6.2.4 н-пентан.

6.2.5 Калия метилат, метанольный раствор, c(CH₃OK) ~= 2 моль/дм³.

Растворяют 7,8 г металлического калия в 100 см³ абсолютного метанола. Раствор готовят ежедневно.

Допускается использовать вместо метанольного раствора метилата калия метанольный раствор метилата натрия с той же концентрацией.

6.2.6 Сульфат натрия безводный.

6.2.7 Метанол безводный.

В колбу, содержащую 250 см³ метанола, добавляют 5 г сульфата натрия (см. 6.2.6). Колбу закрывают и энергично встряхивают. Раствор фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу (см. 6.3.1) и колбу плотно закрывают.

6.2.8 Соляная кислота, метанольный раствор, w(HCl) ~= 20%.

Взвешивают с записью результата до первого десятичного знака 80 г метанола (см. 6.2.7) в коническую колбу (см. 6.3.1).

При охлаждении через перемешиваемый метанол пропускают струю газообразного хлористого водорода до тех пор, пока масса раствора не увеличится на 20 г. Раствор охлаждают.

Срок хранения раствора в плотно закрытой емкости в темноте не более 3 мес.

6.3 Оборудование и средства измерения

Используют обычное лабораторное оборудование, в частности:

6.3.1 Конические колбы вместимостью 250 см³ со шлифованным горлом, снабженные шлифованными стеклянными пробками.

6.3.2 Реакционные виалы, вместимостью около 10 см³, оснащенные завинчивающимися крышками с вкладышем.

6.3.3 Градуированные цилиндры, вместимостью 10 см³.

6.3.4 Термостат, способный поддерживать температуру (85 +/- 3) °C и снабженный магнитной мешалкой.

6.4 Проведение испытаний

В две виалы (см. 6.3.2) взвешивают с записью до первого десятичного знака от 50 до 75 мг подготовленной анализируемой пробы (см. раздел 4). В одну из виал в качестве внутреннего стандарта добавляют гептадекановую кислоту (см. 6.2.2) массой около 20% от массы навески и взвешенную с записью до первого десятичного знака.

Испытание проводят параллельно в двух виалах.

В каждую виалу добавляют 4 см³ н-гексана (см. 6.2.3). Если для газохроматографического анализа используется холодный впрыск в колонку, то для жирных кислот с менее чем 10 атомами углерода вместо н-гексана добавляют 4 см³ н-пентана.

Добавляют около 75 мг безводного сульфата натрия (6.2.6) и встряхивают до растворения пробы.

В реакционную виалу добавляют 0,20 см³ метилата калия (см. 6.2.5), закрывают ее и энергично встряхивают в течение 20 - 50 с. Раствор немедленно мутнеет вследствие образования глицерина, который быстро оседает. Добавляют 2 см³ метанольного раствора соляной кислоты (см. 6.2.8) и перемешивают магнитной мешалкой. Реакционную виалу закрывают, помещают в нагревательный блок (см. 6.3.4), заранее нагретый до температуры 85 °C, и выдерживают в течение 20 мин при постоянном перемешивании. В течение этого периода смесь встряхивают несколько раз.

Виалу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, энергично встряхивая под струей холодной водопроводной воды.

Верхний слой с метиловыми эфирами сливают. Растворитель из раствора метиловых эфиров не удаляют.

Полученный раствор метиловых эфиров используют для газохроматографического определения содержания жирных кислот по ГОСТ ISO/TS 17764-2.

Если масса навески была от 50 мг до 75 мг, то массовая доля метиловых эфиров в растворе составит около 2%.

Если для газохроматографического анализа используется холодный впрыск в колонку, то экстракт разбавляют. Для этого в мерную колбу вместимостью 25 см³ вносят пипеткой 0,25 см³ экстракта и н-гексаном (см. 6.2.4) доводят объем раствора до метки.