ГОСТ ISO 7218-2015. Межгосударственный стандарт. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям
Приложение B
(справочное)
ДОВЕРИТЕЛЬНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ ДЛЯ МЕТОДИКИ ПОДСЧЕТА КОЛОНИЙ
B.1 Доверительные интервалы для методики подсчета колоний
Для оценки достоверности результатов и во избежание чрезмерно строгих интерпретаций, необходимо оценить погрешность измерения или, при невозможности, оценить доверительный интервал, который характеризует микробиологическое статистическое распределение в пробе.
При отсутствии значения недостоверности измерений, доверительный интервал , который характеризует микробиологическую дисперсию, может быть рассчитан по формуле B.1 (с вероятностью 95%):
(B.1)
где B = V(n1 + 0,1n2),
где V - объем инокулята в каждой чашке, см3;
n1 - число чашек, отобранных для первого разведения;
n2 - число чашек, отобранных для второго разведения;
- сумма колоний, подсчитанных на чашках, отобранных для двух последовательных разведений;
d - коэффициент разбавления для первого разведения.
ПРИМЕР 1
Подсчет дал следующие результаты (метод с использованием одной чашки на разбавление):
- при первом отобранном разведении (10-2): 215 колоний;
- при втором отобранном разведении (10-3): 14 колоний.
Результат округляют, как это установлено в основном тексте документа, количество микроорганизмов равно 21 000 или 2,1·104 на кубический сантиметр или грамм продукта.
При N = 2,1·104 на грамм, для 229 подсчитанных колоний доверительный интервал равен:
Таким образом, пределы доверительного интервала равны:
и
.
ПРИМЕР 2
Подсчет дал следующие результаты (метод с использованием двух чашек на разбавление):
- при первом отобранном разведении (10-2): 168 и 215 колоний;
- при втором отобранном разведении (10-3): 14 и 25 колоний.
Результат округляют, как это установлено в основном тексте документа, количество микроорганизмов равно 19 000 или 1,9·104 на кубический сантиметр или грамм продукта.
При N = 1,9·104 на грамм, для 422 подсчитанных колоний доверительный интервал равен:
Таким образом, пределы доверительного интервала равны:
и
.
Таблица B.1 содержит средневзвешенные значения и доверительные интервалы для соответствующего количества колоний.
Таблица B.1
Средневзвешенные значения и доверительные
интервалы для соответствующего количества колоний
Средневзвешенные значения числа колоний, подсчитанных для двух последовательных разведений | Способ "1 чашка на разведение" Доверительный интервал | Способ "2 чашки на разведение" Доверительный интервал |
300 | 268 - 332 | 277 - 323 |
150 | 127 - 173 | 134 - 166 |
100 | 81 - 119 | 87 - 113 |
30 | 20 - 40 | 23 - 37 |
15 | 7 - 22 | 10 - 20 |
10 | 4 - 16 | 6 - 14 |
7 | Неприменимо | 3 - 10 |
B.2 Особые случаи для малых количеств
Доверительные интервалы приведены в таблицах B.2 - B.5.
Таблица B.2
Доверительные интервалы для подсчета по методу
"одна чашка на разведение", случай малых количеств,
подсчитанных на отдельной чашке
Число колоний <a> | Доверительные пределы при аппроксимированном доверительном уровне 95% <b> | Доверительный предел, в процентах | |
Нижний | Верхний | ||
1 | < 1 | 3 | +/- 196 |
2 | < 1 | 5 | +/- 139 |
3 | < 1 | 6 | +/- 113 |
4 | < 1 | 8 | +/- 98 |
5 | < 1 | 9 | +/- 88 |
6 | 1 | 11 | +/- 80 |
7 | 2 | 12 | +/- 74 |
8 | 2 | 14 | +/- 69 |
9 | 3 | 15 | +/- 65 |
10 | 4 | 16 | +/- 62 |
11 | 4 | 18 | +/- 59 |
12 | 5 | 19 | +/- 57 |
13 | 6 | 20 | +/- 54 |
14 | 7 | 21 | +/- 52 |
15 | 7 | 23 | +/- 51 |
<a> Количество колоний, подсчитанных на одной чашке при одном разведении. <b> По сравнению с числом подсчитанных микроорганизмов и исходя из предположения, что подсчет произведен на одной чашке при одном разведении. |
Таблица B.3
Доверительные пределы для подсчета по методу
"одна чашка на разведение", случай малых количеств,
подсчитанных на двух отдельных чашках при двух разведениях
Число колоний <a> | Число микроорганизмов <b> | Доверительные пределы при аппроксимированном доверительном уровне 95% <c> | Доверительный предел, в процентах | |
Нижний | Верхний | |||
1 | NA <d> | NA | NA | NA |
2 | NA | NA | NA | NA |
3 | NA | NA | NA | NA |
4 | NA | NA | NA | NA |
5 | NA | NA | NA | NA |
6 | NA | NA | NA | NA |
7 | NA | NA | NA | NA |
8 | NA | NA | NA | NA |
9 | NA | NA | NA | NA |
10 | 9 | 3 | 15 | +/- 62 |
11 | 10 | 4 | 16 | +/- 59 |
12 | 11 | 5 | 17 | +/- 57 |
13 | 12 | 5 | 18 | +/- 54 |
14 | 13 | 6 | 19 | +/- 52 |
15 | 14 | 7 | 21 | +/- 51 |
<a> Число колоний, подсчитанных на одной чашке Петри при двух последовательных разведениях. <b> Средневзвешенное значение для двух чашек Петри. <c> По сравнению с числом подсчитанных микроорганизмов и исходя из предположения, что подсчет произведен на одной чашке при двух разведениях. <d> Неприменимо (Not available, NA): средневзвешенное значение нельзя рассчитать. |
Таблица B.4
Доверительные пределы для подсчета по методу
"две чашки на разведение", случай малых количеств,
подсчитанных на двух чашках при одном разведении
Число колоний <a> | Число микроорганизмов <b> | Доверительные пределы при аппроксимированном доверительном уровне 95% <c> | Доверительные пределы, в процентах | |
Нижний | Верхний | |||
1 | 1 | < 1 | 1 | +/- 196 |
2 | 1 | < 1 | 2 | +/- 139 |
3 | 2 | < 1 | 3 | +/- 113 |
4 | 2 | < 1 | 4 | +/- 98 |
5 | 3 | < 1 | 5 | +/- 88 |
6 | 3 | < 1 | 5 | +/- 80 |
7 | 4 | < 1 | 6 | +/- 74 |
8 | 4 | 1 | 7 | +/- 69 |
9 | 5 | 2 | 7 | +/- 65 |
10 | 5 | 2 | 8 | +/- 62 |
11 | 6 | 2 | 9 | +/- 59 |
12 | 6 | 3 | 9 | +/- 57 |
13 | 7 | 3 | 10 | +/- 54 |
14 | 7 | 3 | 11 | +/- 52 |
15 | 8 | 4 | 11 | +/- 51 |
16 | 8 | 4 | 12 | +/- 49 |
17 | 9 | 4 | 13 | +/- 48 |
18 | 9 | 5 | 13 | +/- 46 |
19 | 10 | 5 | 14 | +/- 45 |
20 | 10 | 6 | 14 | +/- 44 |
21 | 11 | 6 | 15 | +/- 43 |
22 | 11 | 6 | 16 | +/- 42 |
23 | 12 | 7 | 16 | +/- 41 |
24 | 12 | 7 | 17 | +/- 40 |
25 | 13 | 8 | 17 | +/- 39 |
26 | 13 | 8 | 18 | +/- 38 |
27 | 14 | 8 | 19 | +/- 38 |
28 | 14 | 9 | 19 | +/- 37 |
29 | 15 | 9 | 20 | +/- 36 |
30 | 15 | 10 | 20 | +/- 36 |
<a> Число колоний, подсчитанное на двух чашках Петри при одном разведении. <b> Среднеарифметическое для двух чашек Петри. <c> По сравнению с числом подсчитанных микроорганизмов и исходя из предположения, что подсчет произведен на двух чашках при одном разведении. |
Таблица B.5
Доверительные интервалы для подсчета по методу
"две чашки на разведение", случай малых количеств,
подсчитанных на двух чашках при двух разведениях
Число колоний <a> | Число микроорганизмов <b> | Доверительные пределы при аппроксимированном доверительном уровне 95% <c> | Доверительные пределы, в процентах | |
Нижний | Верхний | |||
1 | NA <d> | NA | NA | NA |
2 | NA | NA | NA | NA |
3 | NA | NA | NA | NA |
4 | NA | NA | NA | NA |
5 | NA | NA | NA | NA |
6 | NA | NA | NA | NA |
7 | NA | NA | NA | NA |
8 | NA | NA | NA | NA |
9 | NA | NA | NA | NA |
10 | NA | NA | NA | NA |
11 | NA | NA | NA | NA |
12 | 5 | 2 | 9 | +/- 57 |
13 | 6 | 3 | 9 | +/- 54 |
14 | 6 | 3 | 10 | +/- 52 |
15 | 7 | 3 | 10 | +/- 51 |
16 | 7 | 4 | 11 | +/- 49 |
17 | 8 | 4 | 11 | +/- 48 |
18 | 8 | 4 | 12 | +/- 46 |
19 | 9 | 5 | 13 | +/- 45 |
20 | 9 | 5 | 13 | +/- 44 |
21 | 10 | 5 | 14 | +/- 43 |
22 | 10 | 6 | 14 | +/- 42 |
23 | 10 | 6 | 15 | +/- 41 |
24 | 11 | 7 | 15 | +/- 40 |
25 | 11 | 7 | 16 | +/- 39 |
26 | 12 | 7 | 16 | +/- 38 |
27 | 12 | 8 | 17 | +/- 38 |
28 | 13 | 8 | 17 | +/- 37 |
29 | 13 | 8 | 18 | +/- 36 |
30 | 14 | 9 | 19 | +/- 36 |
<a> Число колоний, подсчитанное на двух чашках Петри при двух последовательных разведениях. <b> Средневзвешенное значение для четырех чашек Петри. <c> По сравнению с числом подсчитанных микроорганизмов и исходя из предположения, что подсчет произведен на двух чашках при двух разведениях. <d> Неприменимо (Not available, NA): средневзвешенное значение нельзя рассчитать. |